Analitica

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

MÉTODOS DE SEPARACIÓN E INSTRUMENTACIÓN ANALÍTICA

PRÁCTICA #2 ANÁLISIS CUANTITATIVO POR CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA

FECHA DE ENTREGA: 28/02/2012
OBJETIVO
* Analizar la concentración de benzofenona en una muestra problema contaminada con dibenzalacetona por cromatografía en capa fina.

REACTIVOS
BenzofenonaEstado físico: Sólido
Peso Molecular: 182 g/mol
Solubilidad: Acetato de etilo

Dibenzalacetona

Estado físico: Sólido
Peso Molecular: 324 g/mol
Solubilidad: Acetato de etilo.


RESULTADOS
Fig1. Cromatografía de una solución de benzofenona a concentraciones de (1) 2.4; (2) 4.8; (3) 9.6 y (4) 19.2 mg/mL, junto con dos muestras problema (5) P2 y (6) P3.
(1) (2) (3)(4) (5) (6)

OBSERVACIÓN
En esta experiencia se pudo observar como las diluciones de la muestra al ser colocadas en la placa de sílice gel, y al estar en contacto con el diluyente (hexano-acetato de etilo9:1) tuvieron un corrimiento ascendente sobre la fase estacionaria (sílice gel), a simple vista se puede decir que las manchas tienen una distancia de corrimiento muy aproximado yque la mancha va aumentando ligeramente de tamaño, así mismo se observa un coleo en la muestra (3) y (4) y en los problemas (5) y (6), en este caso las muestras son puestas en manifiesto con una lámpara de luz ultravioleta.

Muestra | Rf | Dilución | Concentración [mg/mL] | “a” [cm] | “b” [cm] | Área [cm2] |
1 | 0,5 | 1:10 | 2,4 | 0,25 | 0,15 | 0,117 |
2 | 0,5 | 1:5 | 4,8 |0,275 | 0,175 | 0,151 |
3 | 0,52 | 1:2.5 | 9,6 | 0,3 | 0,2 | 0,188 |
4 | 0,51 | 1:1.25 | 19,2 | 0,325 | 0,2 | 0,204 |
P2 | 0,51 | --- | 18,88 | 0,3 | 0,225 | 0,212 |
P3 | 0,51 | --- | 31,92 | 0,35 | 0,25 | 0,274 |





Tabla1. Resultados obtenidos para cada una de las muestras aplicadas de benzofenona y las dos muestras problema.


Gráfica1.Curva tipo de la concentración de benzofenona


y = 0,0048x + 0,1222

Ecuación de la recta:


r2=0,8224
r=0,9068

CÁLCULOS

* Ejemplo de cálculo del Rf.

Rf=Distancia recorrida por el sustratoDistancia recorrida por el disolvente

Rf1=1.9cm3.8cm

Rf1=0.5

* Ejemplos de cálculo para las diferentes concentraciones de benzofenona

Se pesaron 600 mgde benzofenona y se depositaron en un matraz aforado de 25 mL, después se aforó hasta la marca con acetato de etilo. De esa solución se tomaron 1, 2, 4 y 8 mL y estos volúmenes se depositaron en cuatro matraces aforados de 10 mL, se aforó con acetato de etilo y se mezcló perfectamente.
Por lo tanto:
24 mg 10 mL
Y1 mg 1 mL

Y1= 2.4 mg

24 mg 1mL
X1 mg 1 mL

X1= 24 mg
C0=600 mg25mL

C0=24mgmL

Concentración M1 =2.4 mg/mL





Ejemplo 2:
192mg 10 mL
Y4 mg 1 mL

Y4= 19.2 mg

24 mg 1mL
X1 mg 8 mL

X4= 192 mg

Concentración M4 =19.2 mg/mL





* Ejemplos del cálculo del área de las manchas

Según la fórmula:

A= π(a)(b)

Donde:
a= radio mayor de la mancha
b= radio menor de la mancha
Ej.1 Área de la mancha1
A1= π x (0.25 cm) x (0.15 cm)
A1= 0.117 cm2
Ej.2 Área del problema 2
AP2= π x (0.3 cm) x (0.225 cm)
AP2= 0.212 cm2






* Cálculos para conocer la concentración de las muestras problema (P2 y P3)

A partir de las 4 concentraciones conocidas de benzofenona se realizó una curva tipo para conocer la concentración de las muestras problema con ayuda del cálculo del área delas manchas de cada una de ellas. Un método muy usado para conocer la concentración de la muestra a partir de su área es “interpolando” el área en el eje “y” de la curva tipo y así conocer el valor de “x” (concentración).
Otra forma más exacta para conocer la concentración de las muestras problema es con ayuda de la ecuación de la recta, que en este caso es: y = 0,0048x + 0,1222
Esta...