anteproyecto




PREPARACIÓN DE FROTIS - TINCIONES Y MORFOLOGIA BACTERIANA


INTEGRANTES:


DOCENTE:
REGILUZ MANCERA DE LA CRUZ

KEVIN MARRUGO VILLAREAL
JESULIN PEREA
ERWIN CABARCAS GUTIERREZ
JORGE ENRIQUE GUERRERO MONTOYA
YO ZARETH LUCIA PEREZ OVIEDO


PROGRAMA:
TECNOLOGIA EN GESTION AMBIENTAL INDUSTRIAL


FUNDACION UNIVERSITARIA TECNOLOGICO COMFENALCO

CARTAGENA D.T Y C.PREPARACIÓN DE FROTIS - TINCIONES Y MORFOLOGIA BACTERIANA

INTRODUCCION
Podemos decir que al realizar esta práctica se obtendrán conocimientos sobre la preparación de frotis, tinciones y morfología bacteriana el cual nos sirve para separar los microrganismos gracias al frotis. Se denomina frotis a la extensión que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o cultivo con objeto de separar lo másposible los microrganismos, ya que si aparecen agrupados en la preparación es muy difícil obtener una imagen clara y nítida. Este frotis debe ser posteriormente fijado al vidrio del portaobjetos para poder aplicar los métodos habituales de tinción que permiten la observación al microscopio de las bacterias sin que la muestra sea arrastrada en los sucesivos lavados. La fijación de una extensiónbacteriana hace que las bacterias queden inactivadas y adheridas al vidrio alterando lo menos posible la morfología y bacteriana y las posibles agrupaciones de células que pudiera haber.
TINCIÓN DE FROTIS BACTERIANO:
¿Cómo se realiza?
Cubrimos el frotis con abundante colorante y dejarlos actuar durante el tiempo que indique el protocolo de cada tinción concreta. Suele oscilar entre 1 y 5minutos. En ocasiones el colorante tiñe sólo en caliente, por lo que el tiempo que dure su actuación se deberá sostener el portaobjetos con unas pinzas sobre la llama del mechero para que humee el colorante, pero teniendo mucho cuidado de que no llegue a hervir ya que se produciría la destrucción de las células.

Lavar la preparación con agua para eliminar el colorante. Esta operación se realizainclinando el portaobjetos y aplicando el chorro de agua en su parte superior de manera que resbale sobre el frotis, pero sin que vaya dirigido directamente sobre él, pues podría arrastrar parte del frotis consigo. Eliminar la máxima cantidad de agua de los portaobjetos golpeándolos por su canto con cuidado contra la superficie de la mesa de trabajo.

Secar el porta presionando entre dos papeles defiltro, pero en ningún caso se debe frotar el porta.

Observar la preparación al microscopio llegando hasta el máximo aumento. Si se quiere montar de forma definitiva no se debe usar ahora el aceite de inmersión.

OBJETIVOS
General:
Reconocer la morfología bacteriana utilizando las técnicas adecuadas de frotis y tinciones

Específicos:
Conocer el uso e importancia de la tinción de Gram enla diferenciación bacteriana.
Diferenciar la utilidad de las diferentes tinciones utilizadas en el laboratorio de microbiología ambiental.

MATERIALES Y REACTIVOS

Laminillas porta – Objetos
Laminillas cubre –Objetos
Aplicadores o hisopos
Vela y fósforos
Coloración de Gram (Cristal Violeta, Solución de Lugol, Alcohol –Acetona, Safranina o fucsina)
4 goteros

MARCO TEORICO
Loscolorantes se utilizan en microbiología para:
Teñir los microrganismos y sus estructuras (cápsulas, flagelos, esporas, gránulos)
Para diferenciarlos en grupos según la forma de tomar dichos colorantes.
Para adicionarlos a los medios de cultivos con el fin de inhibir el crecimiento de un grupo determinado de gérmenes.

Los colorantes bacterianos son anilinas que contienen radicales que impartensu propiedad cromógena al colorante y grupos auxócromos que permiten que el colorante se una a las fibras o tejidos. Si la porción coloreada (cromógeno) actúa como base, se les denomina colorantes básicos (catiónicos) y sí el cromógeno actúa como ácido se llaman colorantes ácidos (aniónicos).
Los núcleos de las células se tiñen mejor con colorantes básicos y el citoplasma con colorantes...