ANTEPROYECTO

TITULO DEL PROYECTO:

Producción y extracción de β ficoeritrina a partir de la microalga Porphyridium cruentum.







INTERES DEL PROYECTO

El perfil químico de los alimentos contiene no sólo productos que son esenciales para el ser humano sino además otros responsables de su olor, textura y color, que son quienes nos persuaden de elegir ese alimento frente a otros posibles.Dentro de estos compuestos encontramos la β ficoeritrina, una sustancia rosa fluorescente, soluble en agua, y que puede utilizarse como colorante alimentario.
Aunque el uso de este pigmento como colorante alimentario no está aun ampliamente extendido, se ha sugerido su uso en postres, gelatinas, y golosinas para niños que fluorescen bajo luz ultravioleta, y bebidas cuyo pH no sea inferior a 5 (pordebajo del cual las propiedades fluorescentes del pigmento se alteran) (Dufossé et al, 2005). Actualmente el uso de colorantes naturales es bastante mejor aceptado por los consumidores que los colorantes obtenidos de modo sintético (Chacón- Lee y González Mariño, 2010).
La B ficoeritrina es una ficobiliproteína que se encuentra de forma natural en algas rojas del género Porphydridium entre otras.Su función dentro del aparato fotosintético es la de pigmento antena, pudiendo transferir a través de las ficocianinas la energía radiante absorbida hacia las clorofilas, y también fotoprotectora. El pico máximo de absorción de la β-ficoeritrina se encuentra sobre los 545nm.
Porphyridium cruentum es una microalga cuya producción de biomasa está bien documentada, pudiendo obtenerse a partir deella, además del citado pigmento, polisacáridos sulfatados y los ácidos poliinsaturados eicosapentaenóico y araquidónico. Las condiciones de cultivo de esta microalga afectan el contenido total de ficobiliproteínas y la proporción de ficoeritrina sobre las proteínas totales. Los estudios existentes se basan principalmente en los efectos de la intensidad de luz y contenido de nitrógeno del medio(Friedman et al, 1991, Gantt et al, 1966, Rebolloso Fuentes et al, 2000, Mazzuca Sobczuk et al. (2006)). Brody and Emerson (1959) reportan que la proporción de ficoeritrina a clorofila en células de Porphyridium cruentum depende simultáneamente de la intensidad de luz y su longitud de onda, pero no se han encontrado referencias bibliográficas acerca de cómo influye la calidad de la luz incidentesobre el contenido en β ficoeritrina de esta microalga en biorreactores.
Una de las mayores dificultades que se encuentran durante la producción de compuestos a partir de microalgas es hallar una forma económica y sencilla de cosechar la biomasa, separarla de la fase acuosa y romper las células para extraer las sustancias de interés. Estas operaciones suelen ser determinantes tanto para el costeeconómico como energético de la producción. El pequeño tamaño de las células, la escasa concentración de biomasa que se suele alcanzar y el gran volumen de cultivo que hay que manejar en las operaciones post-cosecha repercuten claramente en la viabilidad económica de la producción.




MATERIALES Y METODOS

Los inóculos de la microalga Porphyridium cruentum se mantienen en medio líquido enmatraces erlenmeyer de 250 ml, taponados con algodón hidrófobo , agitados mediante un agitador orbital OVAN, modelo K3E a 150 RPM e iluminados a 200 µE/m-2s-1 mediante dos lámparas fluorescentes Phillips TLD36W/5. Estos cultivos se realizan en el mismo medio que se utilizará posteriormente.
Todas las manipulaciones del inóculo se realizan bajo campana de flujo laminar vertical (Telstar, Au-100)Para la preparación de los medios de cultivo se emplea agua de mar directamente bombeada desde la costa, prefiltrada a través de dos filtros de 20µm y 10µm, y luego se filtra a través de filtros Milipore de 0,2 µm. Posteriormente se le añade el volumen requerido de las disoluciones stock de nutrientes preparadas, las cuales han sido previamente esterilizadas durante 20 minutos a 120 ºC en...