Anteras, Haploides

Mejoramiento genético: Obtención de planta haploides a través del cultivo de granos de polen.
Díaz, Juan Fernando; González, Andrea.
Laboratorio de Cultivo de Tejidos Vegetales in vitro, Ingeniería en Biotecnología, Departamento de Ciencias de la Vida, Escuela Politécnica del Ejército.
18 de enero de 2012

Resumen:
La obtención de individuos haploides estériles mediante anteras es una delas técnicas de cultivo de tejidos in vitro que está ganando auge, en especial cuando se trata de hacer fitomejoramiento. El objetivo de la práctica fue sembrar y cultivar anteras de las flores empleadas por nosotros, lirios (Lilium candidum), siguiendo la metodología adecuadamente en cuanto a desinfección y sembrado del material se refiere. Tras el lavado y desinfección de las flores, las anterasse cultivaron completas en medio Murashige y Skoog enriquecido con 2.5mg/L de 2,4-D, 40g/L de azúcar y 7.5g/L de agar, y pH ajustado a 5.7-5.8. Se controló contaminación durante la segunda y tercera semana luego de la siembra, durante la incubación, consiguiendo un 0% de frascos contaminados. De los cuatro frascos sembrados, dos de ellos empezaron el proceso de necrosis del tejido de la antera, quecubre al polen, lo que antecede normalmente a la generación de callo a partir de los granos polínicos. Además se discutió de los posibles resultados obtenidos tras más semanas de incubación, y de los factores que afectan la androgénesis.

Introducción:
Los organismos haploides han tenido una enorme importancia desde que se los descubrió naturalmente en algunas especies vegetales, las cualeslos producían espontáneamente, pero con una frecuencia muy baja (7).
Existen algunas formas de considerar a los organismos haploides, esto respecto a si provienen de otros seres diploides o poliploides. Independientemente de ello, para este caso se considerará como individuos haploides a aquellos que tengan una constitución cromosómica igual a la mitad del número cromosómico normal de la especie,en células somáticas (7).
La demanda mundial actual no puede ser satisfecha con las técnicas tradicionales de mejoramiento vegetal, es por ello que con los avances en biotecnología y biología molecular se ha implementado el desarrollo de los haploides y los doble haploides (7).
Para originar este tipo de organismos, la ciencia se ha valido de la hibridación interespecífica o intergenérica, y elcultivo de esporas masculinas y femeninas. Estas metodologías de fitomejoramiento han permitido fijar sistemas genéticos de gametos individuales, fáciles de evaluar en cualquier momento del mejoramiento; además se puede conseguir líneas homocigóticas sin usar la endogamia normal (6, 8).
El obtener líneas puras (homocigotas) suele requerir de una cantidad importante de autofecundaciones, mientrasque con el uso de los haploides y doble haploides se puede llegar a tener homocigotas en apenas una sola generación, lo cual implica reducir costos de producción y tiempo utilizado. Por otra parte esta tecnología tiene su aplicación en estudios genómicos y citogenéticos, construcción de mapas genéticos y evaluación de diversidad genética (7, 10).
El uso de anteras para generar organismoshaploides, a partir del polen contenido en ellas, fue descubierto por Guha y Maheshwari en 1966, al cultivar anteras de Datura innoxia Mill. (7). Este proceso se llama androgénesis (8), y ha demostrado su utilidad en la familia de las solanáceas, crucíferas, gramíneas y ranunculáceas (7, 8, 10). Sin embargo, no se ha conseguido el mismo éxito con especias arbustivas y arbóreas (7).
Se debe tener claro quelas plantas originadas por esta técnica de cultivo de tejidos, no se originan de la antera en sí, sino del grano de polen, ya que es éste el que tiene la carga genética haploide, mientras que la antera es tejido diploide (4, 7).
El objetivo de esta práctica fue el de sembrar y cultivar anteras en medio MS enriquecido, para mediante los granos de polen, obtener plantas haploides estériles....