Antibiograma

Lineamientos Internacionales para antibiograma
Alumna: Cinthya Vianey Hernández Zapata Grado 4° Grupo: “C”
Fecha: 7/Junio/2012 Maestra: Q.F.B Sonia Yolanda Justiniano Apolinar M. en C.
Referencia: http://www.saludcapital.gov.co/sitios/VigilanciaSaludPublica/SiteCollectionDocuments/Manual_Resistencia_SDS_2010.pdf (MANUAL DE ACTUALIZACION EN RESISTENCIA BACTERIANA Y NORMASCLSI M100 – S20 2010.)

GENERALIDADES
Métodos de detección de susceptibilidad antimicrobiana
Método de Microdilución en Caldo

La concentración Inhibitoria Mínima (CIM) está definida como la más baja concentración de un agente antimicrobiano que inhibe el crecimiento bacteriano. Es un método cuantitativo que utiliza diluciones dobles seriadas del antimicrobiano y se expresa el resultado enµg/mL. Los resultados obtenidos con el método de microdiución en caldo pueden ser afectados por diversas variables que deben ser controladas para asegurar la exactitud y reproducibilidad de los resultados:

• Medio de cultivo:
Se utiliza Caldo Mueller Hinton ajustado con cationes, el cual contiene 20 a 25 mg de Ca++ y 10 a 12,5 mg de Mg++. Insuficiente cantidad de cationes puede aumentar laactividad de los aminoglucósidos y viceversa.

• Cantidad de inhibidores:
Una baja cantidad de inhibidores pueden afectar las pruebas de susceptibilidad de sulfonamidas, trimetoprim y tetraciclinas.

• pH:
Debe estar entre 7.2 y 7.4. Un pH bajo puede bajar la potencia de aminoglucosidos y macrólidos mientras que otros agentes antimicrobianos pueden parecer tener mayor actividad como lastetraciclinas. Si el pH es alto se observa el efecto contrario.

• Turbidez del Inóculo:
Preparar el inóculo del microorganismo con suspensión directa de la colonia ó por crecimiento en fase logarítmica, ajustando el inoculo al estándar 0.5 McFarland

• Incubación:
Incubar las placas en ambiente aerobio a 35±2ºC de 16 a 20 horas dependiendo del microorganismo a probar.

Método de Difusión enDisco

En muchos laboratorios de Microbiología se utiliza el método de difusión en disco como de rutina para microorganismos de rápido crecimiento y microorganismos de crecimiento exigente.
El método de difusión en disco está basado en la presencia ó ausencia de una zona de inhibición de crecimiento, que se mide en milímetros. La interpretación de la prueba esta basada en la correlación entreel diámetro de la zona de inhibición (mm) con la CIM (µg/mL) para cada antimicrobiano y microorganismo.

Los resultados obtenidos con el método de difusión en disco pueden estar afectados por varios factores que deben ser controlados para asegurar la confiabilidad y reproducibilidad de los resultados:

• Medio de cultivo:
Se utiliza Agar Mueller Hinton que está formulado y avalado de acuerdo alos criterios de CLSI. El medio debe tener una profundidad de 4mm.

• Cationes divalentes:
Variaciones en los cationes de Ca++ y Mg++ pueden afectar los resultados de aminoglucósidos y tetraciclinas para P. aeruginosa, exceso de cationes pueden dar una falsa resistencia y baja cantidad de cationes una falsa sensibilidad. Variaciones en los niveles de calcio pueden afectar los resultados paradaptomicina. Excesiva cantidad de iones de zinc puede dar una falsa resistencia a carbapenemes.

• Cantidad de timina y timidina:
Una cantidad excesiva de timina y timidina puede revertir el efecto inhibitorio de
sulfonamidas y trimetoprim causando una falsa resistencia.

• pH:
Debe estar entre 7.2 y 7.4. Un pH bajo puede bajar la potencia de aminoglucosidos y
macrólidos mientras queotros agentes antimicrobianos pueden parecer tener mayor
actividad como las tetraciclinas. Si el pH es alto se observa el efecto contrario.

• Turbidez del Inóculo:
Preparar el inóculo del microorganismo con suspensión directa de la colonia, lo cual es
recomendado para microorganismos exigentes (Haemophilus spp, Neisserias spp y
Streptococcus); se ajusta la suspensión del microorganismo...