Análisis Comparativo En La Determinación De Proteínas Por El Método Biuret y El Método Kjeldahl

Consistencia
Biuret:: Los compuestos que tienen dos o más uniones peptídicas (péptidos y proteínas) dan color púrpura característico cuando se tratan con una solución alcalina de sulfato decobre diluida. El color se debe aparentemente al complejo de coordinación del Cu con cuatro átomos de nitrógeno, que participan en el enlace peptídico. Este método es reproducible, pero requiere unaalta concentración de proteínas para la formación de color. La sensibilidad del método es de 0,25 – 200 mg de proteínas por mL de solución.

Ventajas:
• Aplicable a todo tipo de alimentos.
•Relativamente simple.
• Barato.
• Preciso.
• Es el método oficial para medir el contenido de la proteína cruda.

Desventajas:

• Mide el nitrógeno orgánico total, no sólo el nitrógenoproteico.
• Consume mucho tiempo (al menos 2 horas para completarse)
• Menos preciso que el método Biuret.
• Usa reactivos corrosivos

Kjeldahl: Se basa en la transformación del nitrógenocontenido en la muestra en sulfato de amonio mediante la digestión con ácido sulfúrico en presencia de un catalizador. El ion amonio obtenido se transforma en medio básico en amoníaco que se destila yvalora con una solución de ácido patrón.

Ventajas:

• Menos caro que el método de kjeldahl
• Rápido (se puede completar en menos de 30 minutos)
• Es el método más simple de análisis deproteínas
• No es frecuente encontrar derivaciones de color
• Pocas substancias no protéicas interfieren con la reacción de biuret
• No detecta n2 de fuentes no protéicas o no peptídicasDesventajas:

• No es muy sensible comparado con el método de lowry
• Requiere de al menos 2 a 4 mg de proteína por prueba
• Las concentraciones altas de sales de amonio interfieren con lareacción
• Puede ocurrir opalescencia en la solución final si están presentes altas concentraciones de lípidos o carbohidratos
• Debe estandarizarse el color mediante cantidades de proteína...