Aplicación De La Espectroscopia Infrarroja En La Reaccion De La POLIFEnOL Oxidasa Y Catecol
XII Congreso Nacional de Biotecnología y Bioingeniería
APLICACIÓN DE LA ESPECTROSCOPIA INFRARROJA EN LA REACCION DE LA POLIFENOL OXIDASA Y CATECOL
J. Hugo Castorena-García, MarlonRojas-López, María Reyna Robles-López, Raul Delgado-Macuil, Raúl René Robles de la Torre, CIBA-IPN, Km 1.5 Carretera Tecuexcomac-Tepetila, 90600, Tlaxcala. Tel 01 248 4 87 07 65, fax, 01 248 4 87 07 66.marlonrl@yahoo.com.mx.
Palabras clave: polifenol oxidasa, espectroscopia infrarroja, catecol. Introducción. La polifenol oxidasa (PFO) es una enzima ampliamente distribuida en el reino vegetal ycataliza dos reacciones diferentes: la hidroxilacion de monofenoles (actividad monofenolasa) y la oxidación de los o-difenoles a o-quinonas (actividad difenolasa). Las o-quinonas son posteriormentepolimerizada para formar pigmentos color café, rojo o negro (1). La PFO ha sido objeto de estudio durante varios años debido a que el oscurecimiento enzimático en frutas y vegetales produce una aparienciadesagradable y la pérdida de sus atributos de calidad. Prevenir esta reacción ha significado un reto muy importante para científicos del área de los alimentos (2). Un sustrato ampliamente utilizado parael estudio de la enzima y sus reacciones es el catecol, el cual también está presente en muchos vegetales, entre ellos el aguacate (3). La espectroscopia IR ha mostrado ser una valiosa herramienta enel análisis de estructuras y cambios estructurales de moléculas biológicas, tanto a nivel de composición como dinámico. El objetivo de este trabajo es la detección y caracterización cinética de lareacción de PFO y catecol, empleando espectroscopia infrarroja en modalidad de reflección total atenuada (ATR-FTIR) como método de análisis. Metodología. Se empleó la PFO de SIGMA (T3824-50KU,tyrosinase-mushrom) la cual se diluyó a 0.1 mg/ml en bufer de fosfatos (HYCEL cat 21231, pH = 7) y Catechol (SIGMA cat 135011) este se diluyó a 120 mM en bufer Triz –HCl 0.1M y pH 7.1. Para el análisis de...
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