Artículo

Rev. Colomb. Cienc. Quím. Farm., Vol. 43 (1), 137-152, 2014

www.farmacia.unal.edu.co
Artículo de investigación clínica

Determinación cualitativa de algunos
metabolitos de seis glucocorticoides en orina
a través de cromatografía líquida de alta
eficiencia acoplada a masas-masas
Ana María Morales Herrera1, Diana Carolina Puerto Avella2, Miguel Ángel Torres Wilches3,
Gloria Gallo Isaza4,Lucrecia Rodríguez R.5, Marian Dalila Vallejo6
Departamento de Farmacia, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia, sede
Bogotá, D. C., Colombia. Correos electrónicos:

1, 2, 3

1

amoralesh@unal.edu.co, 2 dcpuertoa@unal.edu.co, 3 matorresw@unal.edu.co.
Laboratorio de Control al Dopaje, Coldeportes Colombia, Bogotá, D. C., Colombia. Correos
electrónicos:

4, 5, 6

4ggallo@coldeportes.gov.co, 5 lrodriguez@coldeportes.gov.co, 6 mariandalila206@hotmail.com.

Recibido para evaluación: 16 de marzo de 2014.
Aceptado para publicación: 24 de mayo de 2014.

Resumen
El uso de glucocorticoides está prohibido en el campo deportivo durante las competencias si son administrados por vía sistémica, para lo cual, wada definió un nivel
de reporte de 30 ng/mL para los compuestos padre y susmetabolitos. En este
trabajo se desarrolló una metodología analítica para la determinación cualitativa
de los principales metabolitos de algunos glucocorticoides sintéticos: betametasona, budesonida, dexametasona, metilprednisolona, prednisolona y triamcinolona acetónido, presentes en muestras de orina conservadas por el Laboratorio de
Control al Dopaje de Coldeportes. La metodología incluyó unacomparación entre
la extracción de los analitos libres y conjugados con glucurónido (para determinar
cuál de las dos fracciones era más útil en el análisis de estas sustancias), su separación por cromatografía líquida de alta eficiencia con ionización positiva y la detección por medio de trampa iónica (hplc-ms/ms). Se seleccionaron los metabolitos
mayoritarios a través de sus tiempos de retención,posteriormente se fragmentaron
para obtener sus espectros y por medio de la abundancia se determinó la cantidad
presente en cada fracción (libre y conjugada). Se identificaron los seis glucocorticoides y un total de doce metabolitos, que permitirán hacer un rastreo más prolon-

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Ana Morales, Diana Puerto, Miguel Torres, Gloria Gallo, Lucrecia Rodríguez, Marian Vallejo

gado del consumo de lassustancias. Además, se confirmó que las cantidades para
la mayoría de los compuestos de interés, fueron más altas en la fracción libre de
las muestras de orina, pero no es posible eliminar el proceso de hidrólisis porque
algunos metabolitos se excretan conjugados.
Palabras clave: glucocorticoides, cromatografía líquida de alta eficiencia, esi espectrometría de masas, análisis de control al dopaje,muestras de orina.

Summary
Qualitative determination of metabolites in urine of six
glucocorticoids by high performance liquid chromatography
coupled to mass-spectrometry
Glucocorticoids use is prohibited on the sport during competitions when they are
administered by systemic routes for which wada defined a reporting level of 30 ng/
ml for parent compounds and their metabolites. In this paper has beendeveloped an
analytical methodology for the qualitative determination of the main metabolites
of some synthetic glucocorticoids: betamethasone, budesonide, dexamethasone,
methylprednisolone, prednisolone and triamcinolone acetonide, present in urine
samples preserved by the Laboratory of Doping Control of Coldeportes. The methodology included a comparison between the extraction of free andconjugated with
glucuronide analytes (to determine which of the two fractions was more useful in
the analysis of these substances), their separation by high performance liquid chromatography with positive ionization and detection using ion trap (hplc-ms-ms).
Major metabolites were selected by their retention times, later fragmented to obtain
its spectra and through their abundance determine the amount...