artefactos histologicos
Conocidos también como artefactos. Son cambios no deseados que se presentan en el corte histológico, producto de accidentes o de una técnica histológica deficiente, sin control de calidad. Son hallazgos frecuentes en los preparados, motivo por el cual es necesario saber reconocer los más comunes. En ocasiones, el estudiante malgasta su tiempo observando e investigando estos artefactosen las láminas histológicas, razón por la que se presentarán algunos de ellos:
Retracción: Ocasionada por los alcoholes o por sobre-calentamiento con la parafina durante el proceso de inclusión. Los asteriscos en las imágenes muestran el espacio producido por la retracción tisular y celular.
CORTE:
- Muescas: Por irregularidades en el filo de la cuchilla.
- Arrugas y pliegues: Al realizarel montaje y no extender los cortes de manera correcta.
COLORACIÓN:.
- Sobrecoloración: Sobre exposición al extenderse en el tiempo de coloración.
- Precipitados: Por no filtrar los colorantes o por formación de precipitados en cortes que han sido elaborados hace mucho tiempo (están vencidos).
MONTAJE:
Burbujas de aire y gotas en el medio de montaje.
TECNICA DE LA PARAFINA
Seutiliza para preparar cortes de tejido y poderlos observar a microscopio, por lo tanto estas son las caracteristicas:
1. OBTENCION O MUESTRA DE TIJIDO:
Se obtienen por una biopsia (extraccion de un fragmento de tejido)
Se diseca con cuidado, el tejido por medio de un instrumento cortante (bisturi, tijeras, pinzas sacabocado, cuchilla para legrar).
tamaño aproximado de 1cm en todassus dimenciones.
En caso de cadaver= se toma una muestra de tejido de preferencia recien muerto para evitar la degradacion.
2. FIJACION:
Evita la degradacion post-mortem.
Endurece los tejidos blandos.
Se usa formaldheido al 4% en solul\cion acuosa amortiguada hasta obtener un pH neutro (formol).
Evita la lisis.
sirve de Antiseptico
Se puede utilizar el tetraoxido deosmio fijador para microscopio electronico.
3. DESHIDRATACION:
Es una deshidratacion gradual (se logra pasar el bloque de tejido por alcohol de diferentes potencies hasta llegar hasta el absoluto).
El alcohol no es un solvente de la parafina, asi que hay que sustituirlo por xilol u otro solvente que se mezcle con el alcohol.
4. ACLARAMIENTO:
Se pasa el bloque deshidratado conalcohol a traves de xilol en cambios sucesivos, hasta sustituir el alcohol por xilol en preparacion para inclusion.
5. INCLUSION:
El bloque penetrado por el xilol, se pasa por parafina caliente varias veces.
La parafina derretida llena los espacios antes ocupados por el agua y al endurecerse, cuando se enfria hace que el bloque este listo para el corte.
6. CORTE:
Se eliminala parafina
Se hace el corte con el microtomo.
El espesor del corte es de 3 a 6 m. 1m = (0.0001mm)(1X106m).
7. TINCION Y MONTAJE:
La tincion se hace con soluciones acuosas para que la parafina que ha penetrado en el corte sea sustituido por agua y pasar la atraves del xilol, para eliminar el xilol y por varios baños de alcolo de diversas potencies y al final con agual.Montaje: se pasa por una serie de recipients con alcohol de diversas potencies hasta llegar al absoluto y despues poe el xilol se pone una gota de balsamo de Canada.
8. CORTES POR CONGELACION:
los resultados son en 10-15 minutos.
examinarlos a corto plazo.
Fijacion suplementaria
A base de nitrogeno liquido
se corta por medio del criostato del microtomo a temperatures menores de cerogrados
se pueden obtener cortes mas gruesos.
TINCION HISTOLOGICA
Los colorants histologicos actuan de dos formas en combinacion
= permiten al observador reconocer algunos componentes tisulares, por tincion diferencial.
= Imparten sus colores en diversas medidas con lo cual hay una graduacion en la colaboracion.
HEMATOXILINA:color basofilo, da un color azul veolaceo y reacciona...
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