Articulo TRADUCIDO

Abstracto
Una evaluación de citocromo P450 (CYP) actividad de la enzima es esencial para caracterizar el metabolismo de fase I de los sistemas biológicos o para evaluar las propiedades de inhibición / inducción de xenobióticos. APP en general, han sido investigados individualmente por sondas individuales, y la formación de metabolito ha sido supervisado por espectrometría de cromatografía-masalíquida (LC-MS). Para aumentar el rendimiento, muchas sondas se han aplicado para evaluar múltiples actividades CYP simultáneamente dentro de un solo experimento. Esta estrategia se llama el enfoque de cóctel, y ya ha sido revisado para in vivo aplicaciones, pero nunca por in vitro queridos. Esta revisión se centra por primera vez en un in vitro enfoque de cóctel, y hace referencia a los artículosmás destacados sobre este tema. Las ventajas y limitaciones de la aplicación de cócteles para el in vitro evaluación de la actividad de las principales APP humanos, a saber, CYP1A2, CYP2A6, CYP2B6, CYP2C8, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6, CYP2E1 y CYP3A subfamilia, se discuten. Este artículo considera las selecciones de reacción de la sonda para cada CYP según las recomendaciones regulatorias, sondear laspropiedades metabólicas (por ejemplo, la especificidad y el volumen de negocios), concentraciones de sonda y sensibilidad analítica, sino que también pone de relieve un reto específico para el diseño de cócteles, que es la interacción sonda sonda. La última parte de la revisión informa algunas metodologías para la incubación de estos cócteles y discute algunas cuestiones importantes en relación conel tiempo de incubación, las concentraciones de enzimas y la preparación de la muestra.

Abreviaturas
ADME, de absorción de distribución-metabolismo-excreción; ADQ, amodiaquina; ANL,anilina; BUF, bufuralol; BUP, bupropión; CAF, la cafeína; COU, cumarina; CRZ,clorzoxazona; CYP, el citocromo P450; DCF, diclofenaco; DDI, interacciónmedicamentosa; DMSO, dimetil sulfóxido; DXM, dextrometorfano;EMEA, Agencia Europea de Medicamentos; ER, etoxiresorufina; ESI, ionización por electrospray; FDA,Administración de Alimentos y Drogas; HH, d hepatocitos humanos; VAM, microsomas hepáticos humanos; LC, cromatografía líquida; MDZ, midazolam; MEL, melatonina; MS,espectrometría de masas; NADPH, nicotinamida adenina dinucleótido fosfato; NCE,nuevas entidades químicas; NDP, nifedipina; OMZ, omeprazol;PCT, paclitaxel; PHN,fenacetina; rhCYP, citocromo P450 humano recombinante; (S) -MP, (S) -mephenytoin; TBM, tolbutamida; TCR, tacrina; TST, la testosterona UV, ultravioleta
Palabras clave
Cóctel; Fenotipo CYP; Microsomas de hígado humano; Interacciones farmacológicas; In vitro metodología



1. Introducción
El citocromo P450 (CYP) subfamilia juega un papel primordial en la biotransformación dexenobióticos [1] y compuestos endógenos [2]. En los últimos años, su contribución relevante al carcinógeno metabolismo de [3] y el impacto clínico de su polimorfismo genético o de las interacciones basadas en CYP de fármaco a fármaco (DDI) [4]  y  [5]También se ha caracterizado. Por tanto, es de suma importancia para evaluar las actividades CYP humanos en el desarrollo de fármacos, los entornos clínicos o enel área toxicológica. Teniendo en cuenta el gran número de evaluaciones de la actividad del CYP realizadas en diferentes campos, in vitro enfoques son esenciales, ya que ofrecen fondo, así como el conocimiento de anticipación para in vivo predicciones [6] de manera eficiente con respecto a los costos y tiempos. Varios ensayos han sido desarrollados para caracterizar in vitro actividades CYPhepática actuando sobre la fuente de enzima CYP (enzimas humanas recombinantes (rhCYPs), microsomas hepáticos humanos (HLM) y de hepatocitos humanos (HH) basados ​​en herramientas), la naturaleza de los sustratos y la modo de detección. Métodos analíticos tradicionales, usando la cromatografía-UV, radiométricos, de fluorescencia y luminiscencia detecciones de líquido tienen algunas limitaciones...