Bachiller
Páginas: 5 (1218 palabras)
Publicado: 5 de noviembre de 2013
AGAR C ETRIMIDE
USO:
El Agar cetrimida se utiliza para el aislamiento selectivo de Pseudomonas aeruginosa a partir de muestras.
FUNDAMENTO:
Su formulación permite el crecimiento selectivo de Pseudomonas aeruginosa y estimula la formación de pigmentos.
PRINCIPIOS Y EXPLICACION DEL PROCEDIMIENTO:
Método microbiológico:
La Pseudomona aeruginosa es un organismo en elmedio ambiente y un importante patógeno
Nosocomial.
El medio se utiliza para el aislamiento de P. aeruginosa en los campos clínicos y farmacéuticos, y se menciona en la farmacopea de Estados Unidos y la farmacopea europea para uso en pruebas de límite microbiano.
Justificación de los ingredientes:
La peptona de gelatina sirve como fuente de nitrógeno.
El glicerol se utiliza comofuente de carbono y energía.
El cloruro de magnesio y el sulfato potásico promueve la formación de piocina, pioverdina, piomelanina y fluoresceína de P. aeruginosa.
La cetrimida (bromuro de cetil trimetil amonio) es un compuesto de amonio cuaternario catiónico que inhibe una amplia variedad de otros organismos, incluidos otras determinadas especies de Pseudomonas y organismos relacionados.El agar es el agente solidificante.
Fórmula: por litro de agua purificada
Digerido pancreático de gelatina 20,0 g
Cloruro de magnesio 1,4 g
Sulfato de potasio 10,0 g
Glicerol 10,0 ml
Cetrimida 0,3 g
Agar 13,6 g
pH 7,2 ± 0,2
CONTROL DE CALIDAD:
Inocular muestras representativas con las cepas siguientes.
Incubar en atmósfera aerobia a 35 – 37 °C y efectuar la lectura delas placas después de 18 – 24 y 42 – 48 h.
Cepas Resultados del crecimiento Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
Crecimiento con pigmento verde azulado alrededor de las colonias; fluorescencia bajo luz UV (254 nm) Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Crecimiento con pigmento verde azulado alrededor de las colonias; fluorescencia bajo luz UV (254 nm) Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637Inhibición de parcial a completa, Escherichia coli ATCC 25922
Inhibición completa. Staphylococcus aureus ATCC 25923
PROCEDIMIENTO DE ANALISIS:
Extender las muestras tan pronto como sea posible después de recibirlas en el laboratorio. La placa con agar Cetrimide se utiliza principalmente para aislar los cultivos puros de las muestras con flora mixta.
Además de utilizar Agar Cetrimide,inocular en Agar Columbia con 5% de Sangre de Ovejo y Agar MacConkey con la muestra, con el fin de aislar todos los patógenos de la muestra.
Incubar a una temperatura de 35 +/- 2 °C durante 18 - 48 h en atmósfera aerobia y efectuar la lectura de las placas al cabo de 18 - 24 horas y después de 42 - 48 horas, en caso necesario.
Resultados:
Después de la incubación, examinar si lasplacas presentan crecimiento y la pigmentación de verde azulada a verde característica alrededor del crecimiento.
La fluorescencia puede detectarse bajo luz UV (254 nm).
La presencia de piocianina puede confirmarse extrayéndola con cloroformo. P. aeruginosa por lo general produce piociania y fluoresceína.
Puede observarse una variación tanto en la morfología de colonias como en la formacióndel pigmento de una cepa a otra.
CARACTERISTICAS DEL RENDIMIENTO Y LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO:
El Agar se utiliza para la muestra clínicas y no clínicas, si se prevé la presencia de P. aeruginosa y se observa un nivel alto de contaminación de otros organismos.
Existen cepas no pigmentadas de P. aeruginosa que crecen en el medio, pero no producen los pigmentos verde azuladoscaracterísticos.
Otros organismos, por ejemplo, determinados organismos no fermentadores y aerobios formadores de esporas (Bacillus y géneros relacionados), de vez en cuando pueden crecer y producir pigmentos amarillentos en este medio.
Se requieren más pruebas bioquímicas para confirmar un aislado como de P. aeruginosa, incluso si la producción de pigmento es la habitual en este medio....
USO:
El Agar cetrimida se utiliza para el aislamiento selectivo de Pseudomonas aeruginosa a partir de muestras.
FUNDAMENTO:
Su formulación permite el crecimiento selectivo de Pseudomonas aeruginosa y estimula la formación de pigmentos.
PRINCIPIOS Y EXPLICACION DEL PROCEDIMIENTO:
Método microbiológico:
La Pseudomona aeruginosa es un organismo en elmedio ambiente y un importante patógeno
Nosocomial.
El medio se utiliza para el aislamiento de P. aeruginosa en los campos clínicos y farmacéuticos, y se menciona en la farmacopea de Estados Unidos y la farmacopea europea para uso en pruebas de límite microbiano.
Justificación de los ingredientes:
La peptona de gelatina sirve como fuente de nitrógeno.
El glicerol se utiliza comofuente de carbono y energía.
El cloruro de magnesio y el sulfato potásico promueve la formación de piocina, pioverdina, piomelanina y fluoresceína de P. aeruginosa.
La cetrimida (bromuro de cetil trimetil amonio) es un compuesto de amonio cuaternario catiónico que inhibe una amplia variedad de otros organismos, incluidos otras determinadas especies de Pseudomonas y organismos relacionados.El agar es el agente solidificante.
Fórmula: por litro de agua purificada
Digerido pancreático de gelatina 20,0 g
Cloruro de magnesio 1,4 g
Sulfato de potasio 10,0 g
Glicerol 10,0 ml
Cetrimida 0,3 g
Agar 13,6 g
pH 7,2 ± 0,2
CONTROL DE CALIDAD:
Inocular muestras representativas con las cepas siguientes.
Incubar en atmósfera aerobia a 35 – 37 °C y efectuar la lectura delas placas después de 18 – 24 y 42 – 48 h.
Cepas Resultados del crecimiento Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
Crecimiento con pigmento verde azulado alrededor de las colonias; fluorescencia bajo luz UV (254 nm) Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Crecimiento con pigmento verde azulado alrededor de las colonias; fluorescencia bajo luz UV (254 nm) Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637Inhibición de parcial a completa, Escherichia coli ATCC 25922
Inhibición completa. Staphylococcus aureus ATCC 25923
PROCEDIMIENTO DE ANALISIS:
Extender las muestras tan pronto como sea posible después de recibirlas en el laboratorio. La placa con agar Cetrimide se utiliza principalmente para aislar los cultivos puros de las muestras con flora mixta.
Además de utilizar Agar Cetrimide,inocular en Agar Columbia con 5% de Sangre de Ovejo y Agar MacConkey con la muestra, con el fin de aislar todos los patógenos de la muestra.
Incubar a una temperatura de 35 +/- 2 °C durante 18 - 48 h en atmósfera aerobia y efectuar la lectura de las placas al cabo de 18 - 24 horas y después de 42 - 48 horas, en caso necesario.
Resultados:
Después de la incubación, examinar si lasplacas presentan crecimiento y la pigmentación de verde azulada a verde característica alrededor del crecimiento.
La fluorescencia puede detectarse bajo luz UV (254 nm).
La presencia de piocianina puede confirmarse extrayéndola con cloroformo. P. aeruginosa por lo general produce piociania y fluoresceína.
Puede observarse una variación tanto en la morfología de colonias como en la formacióndel pigmento de una cepa a otra.
CARACTERISTICAS DEL RENDIMIENTO Y LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO:
El Agar se utiliza para la muestra clínicas y no clínicas, si se prevé la presencia de P. aeruginosa y se observa un nivel alto de contaminación de otros organismos.
Existen cepas no pigmentadas de P. aeruginosa que crecen en el medio, pero no producen los pigmentos verde azuladoscaracterísticos.
Otros organismos, por ejemplo, determinados organismos no fermentadores y aerobios formadores de esporas (Bacillus y géneros relacionados), de vez en cuando pueden crecer y producir pigmentos amarillentos en este medio.
Se requieren más pruebas bioquímicas para confirmar un aislado como de P. aeruginosa, incluso si la producción de pigmento es la habitual en este medio....
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