Bachiller

EL LABORATORIO EN EL ESTUDIO DE LAS PROTEINAS
1) LAS PROTEINAS Y SU ANALISIS: DEFINICION DE PROTEINAS: Las proteínas son macromoléculas constituidas por 1-alfa-aminoácidos unidos entre si por enlaces covalentes amino-carboxílicos parcialmente ionizados que también se conocen como enlaces peptídicos y son particularmente adecuados para formar a su vez enlaces por puente de Hidrógeno. ESTRUCTURADE LAS PROTEINAS: - PRIMARIA: Formada por la secuencia de aminoácidos unidos por enlaces covalentes - SECUNDARIA: Producida por la conformación que causen los enlaces de puente de Hidrógeno. Puede ser de distintos tipos como: Hélice-Alfa, Hélice de Colágeno, Hoja plegada Beta, Bucle Beta, etc… - TERCIARIA: Es la estructura tridimensional y espacial de la proteína. Se debe a interaccioneselectrostáticas, fuerzas de Van der Waals, etc… -CUATERNARIA: Se refiere a la estructura que adopta la proteína cuando está formada por más de una unidad proteica o más de una secuencia de aminoácidos como la Hemoglobina o los anticuerpos. La estructura cuaternaria tiene relación directa con la función de la proteína. Es esencial para el correcto funcionamiento de la proteína respecto a la acción biológicaque tenga.

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FUNCIONES DE LAS PROTEINAS: - Formación y conservación estructural: Colágeno, Histonas. - Función transportadora: Hemoglobina, Prealbúmina, canales iónicos. - Función protectora y de defensa: Inmunoglobulinas, Complemento, Sistema HLA. - Función de control y regulación: Hormonas (Insulina), Factores de transcripción. - Catálisis: Enzimas (actuan degradando otras proteínas) -Movimiento: Proteínas de la contracción muscular (Actina, Miosina). - Almacenamiento : Ferritina. METABOLISMO DE LAS PROTEINAS: Las proteínas se sintetizan en diferentes lugares: Hígado Células plasmáticas: Localizadas en diferentes órganos como bazo, gánglios linfáticos, médula ósea, intestino, pulmones, etc… Sintetizan Inmunoglobulinas. - Macrófagos: Sintetizan parte del sistema del complemento. Lasíntesis puede disminuir por: - Baja disponibilidad de aminoácidos (por malnutrición, caquexia, síndromes de malabsorción, ayuno, etc…) - Disminución de células sintetizadoras de proteínas (por defectos congénitos, tóxicos como fármacos o radiaciones, por inflamación y/o necrosis como en hepatitis, cirrosis, metástasis hepáticas o medulares, inmunodeficiencias, etc…) La síntesis puede estaraumentada por: Causas fisiológicas: Embarazo. Neoplasias: Mieloma. Causas reactivas: inflamación, cirrosis, enfermedades del Colágeno, etc… - Causa reactiva con fin compensador: Déficits de Fe con aumento de Transferrina.
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La eliminación o catabolismo de las proteínas se realiza en: - Piel, intestino, glándulas exocrinas, sistema respiratorio, etc por pérdidas externas. - hígado, sistemaretículo-endotelial, etc por catabolismo endógeno. El catabolismo puede estar aumentado por: Aumento de pérdidas externas: (hemorragia, proteinuria, gastroenteropatías, quemaduras) - Aumento de consumo de proteínas con función biológica concreta y definida: Fibrinógeno, Haptoglobina, Complemento, etc… - Aumento del catabolismo celular en los tejidos como en casos de inflamación, neoplasias, etc…

2)TECNICAS INSTRUMENTALES PARA el estudio de las PROTEINAS Pueden ser de diferentes tipos: - Técnicas espectrofotométricas: Basadas en la Ley de Lambert-Beer. - Técnicas para determinación de proteínas totales en suero: a) proteínas-Cu. c) Refractometría d) Absorbancia a 270-290 nm: debido a la absorción de aminoácidos con grupos aromáticos como Tirosina, Fenilalanina y Triptófano. - Técnicas paradeterminación de Albúmina en suero: Basadas en la formación de complejos de Albúmina-BCG que a un determinado pH producen un colorante azul verdoso cuya intensidad es proporcional a la concentración de Albúmina. - Técnicas para determinación de proteínas totales en LCR: a) Método de Lowry: A partir de un reactivo de Folin-Cioucalteau, las proteínas reaccionan con Cu en medio alcalino y se forma un...