Bachillerato

INSTITUTO TECNOLÓGICO DE COSTA RICA

ESCUELA DE BIOLOGÍA

INFORME DE TRABAJO FINAL DE GRADUACIÓN

AISLAMIENTO, TIPIFICACIÓN Y VALORACIÓN DEL POTENCIAL BIOFERTILIZANTE DE CEPAS NATIVAS DE AZOTOBACTER SPP.

Alexander Schmidt Durán

Cartago, 2010

INSTITUTO TECNOLÓGICO DE COSTA RICA

ESCUELA DE BIOLOGÍA

INFORME DE TRABAJO FINAL DE GRADUACIÓN

AISLAMIENTO, TIPIFICACIÓN YVALORACIÓN DEL POTENCIAL BIOFERTILIZANTE DE CEPAS NATIVAS DE AZOTOBACTER SPP.

Alexander Schmidt Durán

Cartago, 2010

AISLAMIENTO, TIPIFICACIÓN Y VALORACIÓN DEL POTENCIAL BIOFERTILIZANTE DE CEPAS NATIVAS DE AZOTOBACTER SPP.

Alexander Schmidt Durán*

RESUMEN El nitrógeno es el elemento más usado para aumentar los rendimientos en la agricultura. Sin embargo, los fertilizantes sintéticos provocanserios problemas ambientales y a la salud. Las bacterias fijadoras de nitrógeno, en donde se destaca Azotobacter sp., son capaces de fijar el nitrógeno atmosférico y transformarlo en amonio, compuesto asimilable por las plantas. Por esta razón se aisló, tipificó y evaluó el potencial biofertilizante de cepas nativas de Azotobacter spp. con el fin de producir un producto que permita sustituir,parcial o totalmente, la fertilización sintética. Para esto, se tomaron muestras de tres suelos diferentes y se trasladaron al Centro de Investigaciones en Biotecnología del Instituto Tecnológico de Costa Rica, donde se aislaron 49 cepas de bacterias fijadoras de nitrógeno utilizando la técnica de gránulos de suelo, siendo 42 de estas presuntivas de Azotobacter spp. por su morfología. Posteriormente,ocho cepas se sometieron a una prueba de pigmentación, en donde se seleccionaron tres cepas diferentes, las cuales se caracterizaron bioquímica y molecularmente identificando presuntivamente dos de ellas como, A.vinelandii y la restante como A.nigricans. Las cepas identificadas fueron inoculadas en plantas de lechuga (Lactuca sativa L.) para evaluar su potencial en la fijación de nitrógeno, siendouna cepa de A.vinelandii la que obtuvo los mejores resultados en peso fresco, peso seco y altura de la plantas. Por último, esta cepa fue sometida a diferentes medios de cultivo, siendo el Caldo Winogradsky el que obtuvo una mayor densidad celular, alcanzando 1,5 x 108 UFC/mL.

 Informe de Trabajo Final de Graduación, Escuela de Biología, Instituto Tecnológico de Costa Rica, Cartago, CostaRica. 2010. 1

AISLAMIENTO, TIPIFICACIÓN Y VALORACIÓN DEL POTENCIAL BIOFERTILIZANTE DE CEPAS NATIVAS DE AZOTOBACTER SPP.

Informe presentado a la Escuela de Biología del Instituto Tecnológico de Costa Rica como requisito parcial para optar al título de Bachiller en Ingeniería en Biotecnología

Miembros del Tribunal

___________________________ MSc. Johnny Peraza Moraga Profesor Asesor-ITCR___________________________ Ing. William Rivera Méndez Asesor-ECOSA

___________________________ MSc. Olga Rivas Solano Lectora

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DEDICATORIA

A Dios, que me dio el milagro de la vida, me brindó Su mano en todo momento y me ofreció la oportunidad de crecer como profesional y como persona.

A mi familia, especialmente mis padres, ya que sin su esfuerzo, apoyo, ayuda, interés ysacrificios este trabajo y todos los trabajos que realicé no se hubieran logrado.

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AGRADECIMIENTOS

A mis tutores Johnny Peraza, por toda su ayuda, paciencia e interés mostrado, y William Rivera, por sus consejos, experiencia y tiempo invertido que permitieron que éste trabajo se haya realizado y haya sido todo un éxito.

A mi lectora Olga Rivas, por sus correcciones oportunas y ayudabrindada, especialmente en la elaboración del informe.

A mi familia, porque sin ellos ni siquiera estaría aquí.

A Dora Flores, profesora de la carrera, por su experiencia y ayuda durante estos tres años que me hicieron ser una persona más consciente, responsable y trabajadora.

A Julián Alvarado y Juan Carlos Solano, por su ayuda constante proporcionando reactivos, equipo, instrumentación y...