bachillerato

RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS

MESÓFILOS REVIVIFICABLES












NELE ZIVKO SÁNCHEZ


OBJETIVO

El objetivo de esta práctica es el recuento en el que se estima la microflora total sin especificar tipos de microorganismos .

En este grupo se incluyen todas las bacterias, mohos y levaduras capaces de desarrollarse a31±ºC en las condiciones establecidas , en este caso hemos usado de muestra agua del Rio Nora.
Este recuento refleja la calidad sanitaria de un alimento, las condiciones de manipulación, las condiciones higiénicas de la materia prima.

Un recuento bajo de aerobios( , es decir, que necesitan oxigeno para sobrevivir) mesófilos no implica o no asegura la ausencia de patógenos o sus toxinas, de la mismamanera un recuento elevado no significa presencia de flora patógena.
Ahora bien , salvo en alimentos obtenidos por fermentación, no son recomendables recuentos elevados.






FUNDAMENTOS


Los aerobios mesófilos son todas aquellas bacterias aerobias facultativas mesófilas o psicófilas capaces de crecer en agar nutritivo.


Se investigan porel método de recuento en placa con siembra en masa o siembra en superficie que se basa en contar el número de recuento en placa de medio de cultivo sólido donde se ha sembrado un volumen conocido de la solución madre o sus disoluciones.


Se deberá contar todas las colonias desarrolladas en cada placa. Los resultados te permitirán verificar la efectividad de los procedimientos de limpieza ydesinfección y determinar si las temperaturas aplicadas en los procesos fueron las adecuadas.







MATERIALES UTILIZADOS

-Tubos de ensayo -Estufa (horno)
-Gradilla - Autoclave
-Vaso de precipitados - Muestra (agua de Rio Nora)
-Frasco lavador (H2O)
-Placaspetri
-Varilla de cristal
-Pipeta
-Pera de seguridad
-Micropipeta
-Puntas de micropipeta
-Mechero bunsen (zona aséptica)
-Trípode y rejilla (solo si calentamos el PCA)
-PCA
-PW
-Asa de siembra en L
-Vortex


PROCEDIMIENTO

RECUENTO POR SIEMBRA EN MASA
En primer lugar prepararemos antes de todo todos los materiales ya nombrados y prepararemoslos medios necesarios que requiere esta práctica.
-PW: prepararemos para 4 tubos de ensayo (0,8 g de muestra PW o TW)
-PCA: prepararemos el agua para los 3 últimos tubos (1,02 g de muestra d PCA)
-Esterilizar el autoclave (121ºC , 1atm , 20min)
Seguidamente habrá que preparar las disoluciones decimales 1ml de muestra / 9ml de PCA.
A partir de las disoluciones decimales sembraremos 1ml de cadadisolución y por duplicado en la placa petri con PCA ( es a lo que llamamos siembra en masa).
Mezclaremos con movimiento rotatorio y lo llevaremos al baño maria para atemperar a 45ºC antes de echar en la placa.
Una vez echo esto se llevara a incubar a 31ºC durante 72h.
Transcurrido este tiempo de incubación, se cuentan las colonias en aquellas placas que muestren entre 30 y 300 coloniasaisladas.Las colonias contadas se irán marcando para evitar errores.
El número total de collonias contadas, m ultiplicado por el factor de dilución de la placa elegida, da como resultado el recuento total de microorganismos / g o mol de muestra analizada.



















RECUENTO POR SIEMBRA EN SUPERFICIE














RECUENTO PORSIEMBRA EN SUPERFICIE

En primer lugar prepararemos antes de todo todos los materiales ya nombrados y prepararemos los medios necesarios que requiere esta práctica.
Mezclaremos con agua 1,435 g de PCA para la primera muestra. El PCA lo llevaremos a ebullición , posteriormente la serie de diluciones decimales que tenemos preparada; se transfiere 0,1 ml de cada dilución a cada placa de PCA ya...