Bacterias

Revista CENIC Ciencias Químicas, Vol. 40, No. 1, 2009.

Validación de un método por Cromatografía de Gases para la determinación de los ácidos grasos que componen el D-004 ingrediente activo
Eduardo A. Rodríguez-Leyes, David Marrero Delange, Víctor L. González Canavaciolo, Roxana Sierra Pérez y Yuliamny Adames Fajardo.
Centro de Productos Naturales, Centro Nacional de InvestigacionesCientíficas, Calle 198 entre Avenidas 19 y 21, Reparto Atabey, Playa, Apartado Postal 6414,Ciudad de La Habana, Cuba.
Recibido: 20 de junio de 2008. Aceptado: 7 de octubre de 2008.

Palabras clave: D-004, ácidos grasos, cromatografía gaseosa, validación, Roystonea regia. Key words: D-004, fatty acids, gas chromatography, validation, Roystonea regia.

RESUMEN. El D-004 es un nuevo ingrediente activoobtenido a partir de los frutos de la palma real cubana (Roystonea regia), el cual ha demostrado su efectividad en modelos experimentales de hiperplasia prostática. Esta sustancia está compuesta principalmente por una mezcla de ácidos grasos (AG) saturados e insaturados libres, entre 8 y 18 átomos de carbono. Se desarrolló y validó un método por cromatografía gaseosa para la determinación de los AGen el D-004. Los AG fueron analizados como ésteres metílicos, obtenidos por reacción con cloruro de acetilo al 10 % en metanol y separados en una columna capilar widebore BPX-5 utilizando ácido tridecanoico como patrón interno. En el estudio de especificidad se demostró que no hubo interferencias en la determinación de esta mezcla, una vez que las muestras fueron sometidas a condiciones de estrés.La determinación del contenido de AG totales fue lineal (r > 0,999; CVs de los factores de respuesta y la pendiente menores que 5 y 2 %, respectivamente) y sin sesgo en todo el intervalo estudiado, desde 50 a 150 % de la masa nominal. Se obtuvieron recobrados elevados en el estudio de exactitud (100,4 a 100,8 %), realizado en un intervalo de 80 a 120 % de la concentración nominal. Se obtuvieronbuenos resultados en los estudios de repetibilidad y precisión intermedia (CV < 2 %), lo que probó que el método es preciso. Conforme a estos resultados, el procedimiento validado es apropiado para el control de calidad y los estudios de estabilidad de este ingrediente activo. ABSTRACT. D-004 is a new active ingredient obtained from the Cuban royal palm (Roystonea regia) fruits. This substance ismainly composed by a mixture of saturated and unsaturated free fatty acids, from 8 to 18 carbon atoms, and has shown to be effective in experimental model of prostate hyperplasia. A capillary gas chromatographic method for the determination of the fatty acids in D-004 was developed and validated. The acids were analyzed as methyl ester derivatives, which were obtained by reaction with 10 % acetylchloride in methanol and separated in a BPX-5 wide-bore column using tridecanoic acid as internal standard. The specificity study showed no interferences regarding the determination of this mixture, once the samples were submitted to stress conditions. Determination of the total fatty acid content was linear (r > 0.999; CVs of the response factors and of the slopes lower than 5 and 2 %,respectively) and without bias in the studied concentration range, from 50 to 150 % of the nominal mass. In the accuracy study, over the range 80 to 120 % of the nominal fatty acid concentration, high recoveries (100.4 to 100.8 %) were reached. Good results were obtained in the repeatability and intermediate precision studies (CV < 2 %), proving that the method is precise. These results support that thismethod is properly validated, being appropriate for the quality control and stability studies of this active ingredient.

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