bacteriologia

UNIVERSIDAD
TECNOLOGICA
NACIONAL
FACULTAD REGIONAL ROSARIO
DEPARTAMENTO DE INGENIERIA QUIMICA

CATEDRA DE BIOTECNOLOGIA

Trabajo práctico n° 1
“Preparación de medios de cultivo”

2009
Jefe de Cátedra: Ing. Eduardo Santambrosio
Jefe de Trabajos Prácticos: Ing. Marta Ortega
Auxiliar de 1°: Ing. Pablo A. Garibaldi

1. OBJETIVOS
Que el alumno se familiarice con los diferentesconstituyentes de los nutrientes que los
microorganismos necesitan para su desarrollo, las formas de preparación de los diferentes
medios de cultivo y su aplicación.
2. FUNDAMENTOS
2.1. Nutrición – Definición

La nutrición es el proceso por el que los seres vivos toman las sustancias químicas que
necesitan para crecer, del medio donde habitan. Dichas sustancias se denominan
nutrientes, y serequieren para dos objetivos:
•
•

Energéticos: Los microorganismos requieren energía del exterior.
Biosintéticos: formar sustancias que constituyen la célula (Ej.: proteínas)

Los nutrientes pueden clasificarse en:
•
•

•

Universales: Son aquellos nutrientes que todos, o bien la mayoría de los
microorganismos, requieren para su crecimiento. Los más importantes son:
agua, dióxido decarbono (CO2), fosfatos, sales minerales.
Particulares: Se trata de elementos que pueden ser cubiertos de modo muy
distinto, dependiendo de las capacidades biosintéticas del microorganismo que
se considere. Concretamente consideraremos los elementos N y S (que
requieren todos los seres vivos).
Factores de crecimiento: Son moléculas orgánicas específicas que algunas
bacterias necesitan, en muypequeña cantidad, para crecer. Salvo excepciones no
tienen función plástica, ni sirven como fuente de energía. Suelen ser coenzimas
o sus precursores, vitaminas, que determinadas bacterias no pueden fabricar por
sí mismas, al carecer de parte (o toda) de una ruta biosintética. Consideraremos
como ejemplos, oligoelementos, vitaminas y minerales.

2.2. Medios de cultivo

Uno de los sistemasmás importantes para la identificación de microorganismos es
observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el
laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio
de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial, éste
debe reunir unaserie de condiciones tales como: temperatura, grado de humedad y
presión de oxígeno adecuadas, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un
medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y
debe estar exento de todo microorganismo contaminante.

Clasificación de medios de cultivo:
•

Según su estado físico:

Líquidos
Usualmente se denominancaldos ya que
contienen los nutrientes disueltos en agua.
Permiten obtener suspensiones con un elevado
número de microorganismos. Ej. Caldo nutritivo.

Sólidos
Se pueden preparar a partir de medios líquidos a los cuales se les añaden agentes
solidificantes como agar, gelatina o sílica gel. Se utilizan con frecuencia en el
aislamiento y mantenimiento de los microorganismos en ellaboratorio. Ej. Agar
nutritivo.

El gelificante más usado es el agar-agar,
extraído de las algas rojas (ej.: Gelidium),
del cual existen versiones más o menos
purificadas. Las más puras que se
enriquecen con el polisacárido agarosa
para evitar la introducción de sustancias
“contaminantes” inadvertidas que falseen
las
interpretaciones
sobre
el
comportamiento
nutricional
del
microorganismo;son las que se emplean
para los medios definidos (Ver más abajo).
El agar presenta la gran ventaja de que una
vez gelificado, no funde hasta cerca de los
100 ° lo que permite su uso para la inmensa mayor ía de los microorganismos, que
C,
son mesófilos.

•

Según la naturaleza de sus constituyentes:

Medios naturales, complejos o indefinidos
Están constituidos por sustancias...