Banda C
La técnica de Banda C fue descubierta por casualidad y originada en un experimento en donde ADN satélite marcado en ratón fue hibridizado in situ con cromosomas de raton. En este experimento, el ADN del cromosoma fue desnaturalizado con NaOH y renaturalizado en buffer SSC. Los sitios hibridizados fueron detectados por autoradiografía usando coloración de Giemsa para cromosomas. La pruebade hibridización preferencialmente fue en las regiones centromericas de los cromosomas. Sin embargo también se noto que el Giemsa coloreo otras regiones en otros cromosomas.
Esta banda se caracteriza por teñir aquellas regiones ricas en heterocromatina constitutiva que corresponden a secuencias de ADN altamente repetitivas; se encuentran principalmente en centrómero, telómeros y ADN satélite yen ocasiones constricciones secundarias como son los NOR’s.
Después del descubrimiento de las técnicas de banda C se desarrolladas técnicas para cromosomas de mamíferos. Mientras en animales se utiliza NaOH para el paso de la desnaturalización, el Ba(OH)2 es usado para producir banda C en cromosomas de plantas siguiendo el método de Summer. Él fue el primero en sugerir que la coloración oscura delGiemsa coloreaba heterocromatina constitutiva causada por la preferencia del ADN altamente repetitivo durante la renaturalización.
Los sitios de los cromosomas que presentan heterocromatina constitutiva y que tiñen Banda C positiva son 1) en la región del centrómero 2) alrededor de la región organizadora nucleolar 3) cerca del sitio del RNA para 5S y 4) en la parte final de los cromosomas esdecir la heterocromatina telomerica, en general estas localizaciones se conocen como centromerica e intercalar y la última categoría incluye todas las otras posiciones.
En el campo de la investigación para aclarar que tipo de elementos son los que se remueven dentro del tratamiento de esta banda, en un estudio en donde se analizó HCl 0.2 N el cual es una de las soluciones utilizadas pararealizar tratamiento para banda C se encontró por medio de electroforesis la presencia de las 5 proteínas histónicas, la que presentaba una banda de mayor intensidad fue la H3 y H4, estando presentes también las otras pero en menor cantidad.
Para cromosomas de plantas, la estandarización de las técnicas en Banda C han mejorado en su resolución y el método ha sido utilizado para la identificación decromosomas. En plantas esta técnica identifica las secuencias que contienen gran cantidad de ADN repetitivo. Por ejemplo en cultivos de centeno Secale cereale en hibridización in situ es utilizada para detectar zonas de ADN altamente repetitivo de las cuales solamente unas pocas colorean Banda C positiva.
Por su parte, en muchas especies de animales domésticos se han encontrado complementoscromosómicos que por las técnicas convencionales de coloración no pueden ser ordenados completamente, debido a la presencia de cromosomas con rasgos morfológicos muy similares. Esto sucede, por ejemplo: con los cromosomas 8, 9 y X del cerdo; con el 11 y el 12 de la misma especie; con los cromosomas 14, 15, 16, 17, 18 y 19 del equino; con los cromosomas 23, 24, 25, 26 y 27 también del equino; y con granparte de los cromosomas del bovino, del ovino y del caprino. Lo anterior generó la necesidad de desarrollar técnicas de coloración denominadas de bandeo, o sea, aquellas que producen patrones constantes de bandas claras y oscuras, característicos de cada cromosoma que permiten identificar los cromosomas sin ambigüedades.
Las técnicas de bandeo han permitido tanto en animales como en vegetales,también, la detección de un gran número de aberraciones cromosómicas, con la correspondiente definición de los componentes del complemento comprometidos en el problema.
Bandas Ag-NOR
Se conoce como bandas Ag-NOR aquella que colorea las Regiones Organizadoras Nucleares (de ahí la nomenclatura NOR) en ocasiones son también llamadas Banda N, su coloración es debido a la afinidad con el Nitrato de...
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