Beta Glucosidasa
Páginas: 14 (3256 palabras)
Publicado: 6 de septiembre de 2011
Pontificia Universidad Católica de Valparaíso Facultad de Ciencias Básicas y Matemáticas Instituto de Química
Sección de Bioquímica
“Efecto de la concentración de Ca2+ en la actividad de β-glucosidasa en células de Sertoli”
Nombres :Carla Alarcón Silva
German Colque
Clave : BQA 445
Profesor : Dr. Juan Reyes
Dr. Cristian Mandiola
Ayudante : Srta. Francisca Benavente
Fecha de entrega: 12 de Agosto de 2010
Índice
Introducción 3
Hipótesis 7
Objetivos 7
Generales7
Específicos 7
Materiales y Método 8
Parte I: Cinética Enzimática 8
Parte II: Extracción y purificación de la enzima 9
Parte III: Evaluación a distintas concentraciones de calcio en la respuesta de la enzima en células de Sertoli 11
Normas de Seguridad 13
Cronograma de trabajo 14
Bibliografía 15
Introducción
Las glucosidasas se caracterizan por catalizar la reacción dehidrólisis de enlaces glucosidicos generando glúcidos menores. Estas enzimas son muy comunes en la naturaleza, desarrollando papeles en la degradación de la biomasa, como celulosa, en la defensa contra bacterias, en mecanismos de patogénesis y en el normal funcionamiento celular.
La reacción global catalizada por las glucosidasas es la siguiente:
[pic]
Las glucosidasas se pueden clasificarpor su mecanismo, existiendo dos grandes tipos:
i. Glucosidasas de inversión
ii. Glucosidasas de retención
En el caso particular de la β-glucosidasa, esta enzima cae dentro de la familia de las Glucosidasas de inversión en donde en el sitio de catálisis actúan dos residuos carboxílicos, uno como base y el otro como acido, teniendo como resultado la siguiente reacción:
[pic]Antecedentes generales:
Nombre común: β-glucosidasa
Nombre sistemático: β-glucosidasa glucohidrolasa
Número EC: 3.2.1.21
Peso molecular: 135 kDa
Reacción enzimática catalizada por β-glucosidasa:
| |+ | | |( | | |+ | | |
|[pic] | | |H2O || |[pic] | | |[pic] |
| |+ | | |( | | |+ | | |
|4-nitrophenyl beta-D-glucopyranoside | | |H2O | | |p-nitrophenol | | |beta-D-glucose |
Muchas clases de glicolipidos son esenciales para la espermatogeneis, y se ha demostrado que dichosglicolipidos son importantes en la formación del acrosoma de los espermatozoides, estudios demuestran que la formación deficiente del acrosoma puede derivar en una infertilidad (fig. 2), otro efecto de la acción deficiente de la glucosidasa es la acumulación de glucolipidos en las células de sertoli, esta enfermedad es conocida como Niemann-Pick1.
En humanos, la enfermedad más común por mutación dela β-glucosidasa es la enfermedad de Gaucher, esta enfermedad es conocida debido a la acumulación de glucoceramida en los lisosomas lo que provoca que se acumulen lipo-polisacaridos en el hígado, el bazo, los huesos y la médula ósea. Dicha acumulación puede provocar Hepatosplenomegalia así como anormalidades hematogicas1.
[pic]
Fig. 1: Funcion de la β-glucosidasa en distintos tiposcelulares
La determinación de la actividad de β-glucosidasa en células de sertoli, puede ser de un potencial farmacológico muy importante, esto debido a que de esta forma se puede evaluar la capacidad de mitigar los efectos de la acumulación de glicolipidos en los distintos tejidos celulares
[pic]
Fig. 2: Distintas consecuencias de la deficiencia de β-glucosidasa
Curiosamente, una de las...
Sección de Bioquímica
“Efecto de la concentración de Ca2+ en la actividad de β-glucosidasa en células de Sertoli”
Nombres :Carla Alarcón Silva
German Colque
Clave : BQA 445
Profesor : Dr. Juan Reyes
Dr. Cristian Mandiola
Ayudante : Srta. Francisca Benavente
Fecha de entrega: 12 de Agosto de 2010
Índice
Introducción 3
Hipótesis 7
Objetivos 7
Generales7
Específicos 7
Materiales y Método 8
Parte I: Cinética Enzimática 8
Parte II: Extracción y purificación de la enzima 9
Parte III: Evaluación a distintas concentraciones de calcio en la respuesta de la enzima en células de Sertoli 11
Normas de Seguridad 13
Cronograma de trabajo 14
Bibliografía 15
Introducción
Las glucosidasas se caracterizan por catalizar la reacción dehidrólisis de enlaces glucosidicos generando glúcidos menores. Estas enzimas son muy comunes en la naturaleza, desarrollando papeles en la degradación de la biomasa, como celulosa, en la defensa contra bacterias, en mecanismos de patogénesis y en el normal funcionamiento celular.
La reacción global catalizada por las glucosidasas es la siguiente:
[pic]
Las glucosidasas se pueden clasificarpor su mecanismo, existiendo dos grandes tipos:
i. Glucosidasas de inversión
ii. Glucosidasas de retención
En el caso particular de la β-glucosidasa, esta enzima cae dentro de la familia de las Glucosidasas de inversión en donde en el sitio de catálisis actúan dos residuos carboxílicos, uno como base y el otro como acido, teniendo como resultado la siguiente reacción:
[pic]Antecedentes generales:
Nombre común: β-glucosidasa
Nombre sistemático: β-glucosidasa glucohidrolasa
Número EC: 3.2.1.21
Peso molecular: 135 kDa
Reacción enzimática catalizada por β-glucosidasa:
| |+ | | |( | | |+ | | |
|[pic] | | |H2O || |[pic] | | |[pic] |
| |+ | | |( | | |+ | | |
|4-nitrophenyl beta-D-glucopyranoside | | |H2O | | |p-nitrophenol | | |beta-D-glucose |
Muchas clases de glicolipidos son esenciales para la espermatogeneis, y se ha demostrado que dichosglicolipidos son importantes en la formación del acrosoma de los espermatozoides, estudios demuestran que la formación deficiente del acrosoma puede derivar en una infertilidad (fig. 2), otro efecto de la acción deficiente de la glucosidasa es la acumulación de glucolipidos en las células de sertoli, esta enfermedad es conocida como Niemann-Pick1.
En humanos, la enfermedad más común por mutación dela β-glucosidasa es la enfermedad de Gaucher, esta enfermedad es conocida debido a la acumulación de glucoceramida en los lisosomas lo que provoca que se acumulen lipo-polisacaridos en el hígado, el bazo, los huesos y la médula ósea. Dicha acumulación puede provocar Hepatosplenomegalia así como anormalidades hematogicas1.
[pic]
Fig. 1: Funcion de la β-glucosidasa en distintos tiposcelulares
La determinación de la actividad de β-glucosidasa en células de sertoli, puede ser de un potencial farmacológico muy importante, esto debido a que de esta forma se puede evaluar la capacidad de mitigar los efectos de la acumulación de glicolipidos en los distintos tejidos celulares
[pic]
Fig. 2: Distintas consecuencias de la deficiencia de β-glucosidasa
Curiosamente, una de las...
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