beta glucosidasa

β – Glucosidasa






























Integrantes
Camila Huidobro Marin
Natali Zamora Bugueño

Introducción
En el presente trabajo se presentan lasprincipales propiedades cinéticas, químicas y físicas relevantes de la enzima que será objeto del proyecto experimental que será llevado a cabo a lo largo de las sesiones de laboratorio, que corresponde ala enzima β-glucosidasa (E.C 3.2.1.21). Esta enzima, se clasifica dentro del grupo de glucohidrolasas y actúa sobre los enlaces β14 que unen dos moléculas de D-glucosa o sustitutos de ésta generandocomo producto una molécula de glucosa o sustituto libre y un alcohol. La reacción general catalizada por la enzima puede verse representada en la figura 1.








La enzima β-glucosidasa seencuentra en una gran cantidad de organismos, al ser utilizada en la degradación de celulosa la cual está compuesta de polímeros unidos entre sí por enlaces β. Esta enzima se ha estudiado desdediversas fuentes distintas, como Escherichia coli o levadura, definiendo parámetros cinéticos y características generales que varían ligeramente entre sí (Grover et all, 1976). En este caso, se trabajará conla variante extraída de almendra (Prunus dulcis), la cual es un homodímero compuesto de dos subunidades iguales de 65KDa cada una y es, además, una glucoproteína. Esta variante se encuentra altamenteestudiada y en literatura pueden encontrarse los valores cinéticos de Km para varios sustratos distintos. Estos se encuentran recopilados en la tabla 1.

Km
Sustrato
Comentario
0,934-nitrophenyl-β-D-fucoside
-
15,7
4-nitrophenyl-β-D-galactoside
-
2,5
4-nitrophenyl-β-D-glucoside
-
3,1
4-nitrophenyl-β-D-xyloside
-
117
Cellobiose
Km aumenta si la enzima está inmovilizada encelulosa
0,38
Oleuropein
Enzima inmobilizada en membranas capilares de polisulfona a pH 6.5 y 25°C
0,48
Oleuropein
Enzima libre, a pH 6,5 y 25°C
Tabla 1. Valores de Km de β-glucosidasa para...