Biólogo

Comunicaciones breves

Acta Farm. Bonaerense 23 (3): 373-5 (2004)
Recibido el 29 de septiembre de 2003
Aceptado el 09 de abril de 2004

Una Reacción de Bioluminiscencia que detecta Trifosfato de Adenosina
(ATP) como determinante de Suciedad Biológica
Guillermo TEMPRANO y Miguel D’AQUINO*
Facultad de Farmacia y Bioquímica - Universidad de Buenos Aires,
Junín 956, 4º Piso, C1113AAD.Buenos Aires, Argentina

RESUMEN. Por medio de la bioluminiscencia se puede detectar la cantidad de ATP presente en una superficie. Esto se relaciona directamente con la suciedad biológica, entendiéndose por tal a la constituída
por sustancias orgánicas de origen vegetal o animal, incluyéndose a los microorganismos. Es opinión generalizada que el ATP es rápidamente destruído luego de la muertecelular por acción de la ATPasa. En la
presente comunicación se publican resultados que ponen en discusión esta afirmación. Se concluye que en
las condiciones de trabajo descriptas, la bioluminiscencia es muy sensible para determinar materia orgánica de origen animado, pero es poco sensible para los microorganismos en particular.
SUMMARY. “The Adenosin Triphosphate [ATP] Reaction as a BiologicalDirty Indicator”. ATP present on a
surface can be quantified by means of bioluminiscence. This is directly related with biological dirty, understanding by such the one composed by organic substances from vegetal or animal origin, including microorganisms. It
is a general opinion that ATP is quickly destroyed after celular death, by action of ATPasa. In the present communication results arepublished that put this affirmation in discussion. It is concluded that under the mentioned
work conditions, bioluminiscence is very sensitive for animated origin organic matter, but is of very low sensitivity for microorganisms in particular.

INTRODUCCIÓN
Se entiende por suciedad biológica la constituída por sustancias orgánicas de origen vegetal
y animal, incluyéndose a los microorganismos.
Losniveles de estas sustancias pueden ser utilizados para ser detectadas sobre diferentes superficies proporcionando una medida de la higiene de las mismas.
El adenosín trifosfato [ATP] es un intermediario del metabolismo energético de todo organisD–luciferina + ATP + O2

Luciferasa / Mg2+

El máximo de emisión se da a 562 nm, y el
rendimiento de la reacción (fotones emitidos en
función delnúmero de moléculas de ATP transformadas) es de aproximadamente 100% 4. El luminómetro expresa las lecturas en URL (Unida-

mo vivo. En 1947 McElroy describe la reacción
de bioluminiscencia del sistema luciferina/luciferasa y demuestra el rol del ATP como factor determinante en la emisión de luz 1. En la década
de 1970 los estudios bioquímicos del sistema luciferina/luciferasa señalan que laemisión luminosa es directamente proporcional a la cantidad
de ATP presente en el medio 2,3, según la siguiente reacción 4:
D–oxiluciferina + PPi–Mg2+ + AMP + CO2 + luz

des Relativas de Luz). En el mercado existen diversos instrumentos cuya sensibilidad es variable, pero la cantidad posible de detectar es de
4,6 10-18 moles de ATP (2,3 10-15 g) 5.
Las ventajas de recurrir a la bioluminiscenciaPALABRAS CLAVE: ATP, Bioluminiscencia, Suciedad Biológica.
KEY WORDS: ATP, Bioluminiscence, Biological Dirty.
* Autor a quien dirigir la correspondencia. E-mail: midaki@ffyb.uba.ar

ISSN 0326-2383

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Temprano, G. & M.D’Aquino

frente a otros métodos clásicos de microbiología
es la de obtener una respuesta al instante, evitándose incubaciones de diversos días que demorarían larespuesta.
Es opinión generalizada que el ATP es rápidamente destruido luego de la muerte celular
por acción de la ATPasa, pudiendo ser esto un
factor determinante en la detección de microorganismos presentes en un producto o una superficie 5,6. En el presente trabajo se publican
resultados que ponen en discusión esta afirmación.
MATERIALES Y MÉTODOS
Se utilizó un luminómetro HY-LITE 2...