Bilirrubina en spinreact

Páginas: 5 (1088 palabras) Publicado: 12 de octubre de 2010
BILIRUBIN T&D

Bilirrubina Total y Directa
DMSO. Colorimétrico
Determinación cuantitativa de bilirrubina IVD
Conservar a 2-8ºC PRINCIPIO DEL MÉTODO
La bilirrubina se convierte en azobilirrubina mediante el ácido sulfanílico diazotado midiéndose fotométricamente. De las dos fracciones presentes en suero, bilirrubin-glucurónido y bilirrubina libre ligada a la albúmina, sólo la primerareacciona en medio acuoso (bilirrubina directa) precisando la segunda la solubilización con dimetilsulfóxido (DMSO) para que reaccione (bilirrubina indirecta). En la determinación de la bilirrubina indirecta se determina también la directa, correspondiendo el resultado a la bilirrubina total. La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de bilirrubina presente en la muestraensayada1,2.

CÁLCULOS
− Con Calibrador: ( A ) Muestra − ( A ) Blanco Muestra x Conc. Calibrador = mg/dL de bilirrubina ( A ) Calibrador − ( A ) Blanco Calibrador

− Con Factor: ((A) Muestra – (A) Blanco Muestra) x Factor* = mg/dL bilirrubina en la muestra *Factor:

Concentración del Calibrador ( A ) Calibrador − ( A ) Blanco Calibrador

Factor teórico: Bilirrubina (T) = 19,1 ; Bilirrubina (D) =14 Factor de conversión: mg/dL x 17,1 = µmol/L.

SIGNIFICADO CLÍNICO
La bilirrubina se origina por la degradación de la hemoglobina. Es transportada del bazo al hígado y se excreta en la bilis. La hiperbilirrubinemia es el resultado de un incremento de la bilirrubina en plasma. Causas más probables de la hiperbilirrubinemia: Bilirrubina Total (T): Aumento de la hemólisis, alteracionesgenéticas, anemia neonatal, alteraciones eritropoyéticas, presencia de drogas. Bilirrubina Directa (D): Colestasis hepática, alteraciones genéticas y alteraciones hepáticas1,5,6. El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

CONTROL DE CALIDAD
Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H Normal y Patológico(Ref. 1002120 y 1002210). Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el instrumento, los reactivos y el calibrador. Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.

VALORES DE REFERENCIA

1

REACTIVOS
R 1 (D) R 2 (T) R3 Opcional Ácido sulfanílico Ácidoclorhídrico (ClH) Ácido sulfanílico Ácido clorhídrico (ClH) Dimetilsulfóxido (DMSO) Sodio nitrito BILIRRUBIN CAL Calibrador de Bilirrubina 20 mg/dL Ref: 1002250 30 mmol/L 150 mmol/L 30 mmol/L 50 mmol/L 7 mol/L 29 mmol/L

Bilirrubina Total Hasta 1,10 mg/dL ≅ 18,81 µmol/L Bilirrubina Directa Hasta 0,25 mg/dL ≅ 4,27 µmol/L Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca suspropios valores de referencia.

CARACTERISTÍCAS DEL MÉTODO
Rango de medida: Desde el límite de detección de (T) 0,5 mg/dL (D) 0.04 mg/L hasta el límite de linealidad de 20 mg/dL. Si la concentración de la muestra es superior al límite de linealidad, diluir 1/2 con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2. Precisión:

PRECAUCIONES
Ácido clorhídrico (ClH): Irritante (Xi) R36/37/38Irrita los ojos, la piel y las vías respiratorias. S26: En caso de contacto con los ojos, lávense inmediata y abundantemente con agua y acudir a un médico.

Bilirrubina T Intraserie (n= 20) Media (mg/dL) 1,12 5,36 SD 0,02 0,12 CV (%) 2,16 2,27 Bilirrubina D Intraserie (n= 20) Media (mg/dL) 0,64 2,28 SD 0,01 0,02 CV (%) 1,91 1,10
Sensibilidad analítica:

Interserie (n= 20) 1,01 5,28 0,04 0,124,77 2,38 Interserie (n= 20) 0,68 2,53 0,02 0,05 2,51 1,95

PREPARACIÓN
Todos los reactivos están listos para su uso.

CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Todos los componentes del kit son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los viales bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita la contaminación durante su uso. No usar reactivos fuera...
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