bilogigia
Páginas: 3 (614 palabras)
Publicado: 30 de octubre de 2013
FECHA: 18-09-11
PRÁCTICA: 1
1. TÍTULO: DETERMINACIÓN DEL VOLUMEN TOTAL PLASMATICO Y VOLUMEN TOTAL SANGUÍNEO EN EL PERRO. UTILIZANDO EL AZUL DE EVANS O T-1824.
2. OBJETIVO:El propósito de esta práctica es determinar el volumen plasmático y el volumen total sanguíneo, utilizando al perro como animal experimental. El mismo procedimiento puede ser empleado en cualquieranimal domestico.
3. MATERIALES
Un perro de 20 Kg o más. (En este caso 27 Kg)
Solución fresca de Azul de Evans o T-1824 al 0.1%.
Jeringas estériles de 5 y 10ml.
1 frasco de 5cc con anticoagulante(oxalato de amonio y oxalato de potasio).
Tubos de centrífuga de 10ml.
Tubos de microhematocrito.
Espectrofotómetro.
4. PROCEDIMIENTO:
Registrar el peso del animal. En este caso es de 27 kg.Obtener una muestra de 2 ml. de sangre en un frasco con anticoagulante y otra de 10 ml. en un tubo de prueba, tomándolo de la vena cefálica derecha.
Inyectar en la misma vena cefálica el T-1824 encantidad ya conocida de 1 ml. de solución al 0,1% por cada 5 kg. de peso, por ello se administra 5.4 ml. ya que el perro pesa 27 kg. Esperar un tiempo prudencial para que el Azul de Evans pueda difundirse ytomar una segunda muestra de sangre de 10 ml. de la vena cefálica izquierda.
La muestra de 2 ml. en el frasco con anticoagulante es empleada para la determinación del hematocrito, para ello seemplea el tubo de micro hematocrito sellado con plastilina por un lado y la micro-centrífuga; se obtiene un hematocrito de 43%.
Las otras dos muestras de 10 ml son centrifugadas; se toma el suerosobrenadante y se pone en la cubeta del colorímetro para la lectura de la transmitancia, se utiliza un espectrofotómetro el cual debe encontrarse bien calibrado a 620 nanómetros. El suero coloreado tieneuna transmitancia de 45%.
La concentración final del T-1824 en el plasma se obtiene, utilizando los valores de la Curva de Calibración preparada en una hoja de papel semi-logarítmico; en ella se...
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