Biocatalisis Enzimatica
Páginas: 19 (4537 palabras)
Publicado: 22 de noviembre de 2012
PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATÓLICA DE VALPARAÍSO
FACULTAD DE INGENIERÍA
ESCUELA DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA
Informe de Laboratorio: Cinética Enzimática
Felipe Pequeño Leclerc
Paola Rebolledo Leal
José Serrano Escudero
Profesor de asignatura: Zaida Cabrera
Lunes 6 de Septiembre de 2010
Introducción
Es sabido que las reacciones químicasnecesitan de cierta cantidad específica de energía para que ocurran. A la energía necesaria para que los reactivos formen el complejo activado se le llama energía de activación, Ea. Sin embargo, las reacciones pueden llevarse a cabo por medio de compuestos llamados Catalizadores, los cuales tienen como función disminuir la Ea necesaria para llevar a cabo la reacción. Podemos encontrar dos grandesgrupos de catalizadores: los inorgánicos y los biológicos, también llamados Enzimas. Es el comportamiento de estas últimas el tema principal del presente informe.
Las enzimas, en su estructura globular, se entrelazan y se pliegan una o más cadenas polipeptídicas, que aportan un pequeño grupo de aminoácidos para formar el sitio activo, o lugar donde se adhiere el sustrato, y donde ocurre lareacción. Una enzima y un sustrato solo formarán el complejo activado si su sitio activo coincide con el sustrato, lo que explica su altísima especificidad.
Las enzimas, como cualquier catalizador, presentan parámetros que definen su comportamiento en función de las condiciones en las que trabaja, el tipo de sustrato sobre el que actúa, concentraciones de sustrato, y de enzima misma, inhibiciones yotros factores que influyen directamente en la cinética enzimática. También, es posible inmovilizar las enzimas en un soporte con el fin de alargar su vida útil y de esta forma lograr una mayor producción con la misma cantidad de catalizador, lo que a largo plazo se traduce en un beneficio económico para las industrias.
En ámbitos prácticos, al momento de realizar una reacción con finesproductivos y catalizada mediante enzimas, se desea que el preparado enzimático adquirido tenga la mejor calidad. Para determinar esto, debemos cuantificar la actividad de la enzima. Se debe tener en cuenta que el preparado enzimático no se compone sólo de enzima, sino que además posee otros tipos de proteínas y compuestos varios que ayudan a su conservación, por lo que, además de los estudios de actividadenzimática, se llevará a cabo la estimación de cantidad de proteínas totales presentes en el preparado para corroborar qué cantidad de enzima propiamente tal hay presente y con ello tener un balance mas exacto en la producción.
En esta experiencia nos abocamos al estudio de la cinética enzimática, además de la concentración proteica de un preparado con actividad lactásica del hongo AspergillusOryzae, y dividiendo este tópico en 3 aspectos:
• Actividad de Enzima Soluble
• Actividad de Enzima Inmovilizada
Actividad de Enzima en presencia de inhibidor
Objetivos
Objetivo general
. -Comprender el comportamiento de las enzimas de forma empírica frente a distintos métodos de operación; soluble, inmovilizada e inhibida.
.
. Objetivos específicos
.
.-Caracterizar el preparado enzimático soluble ENZECO corp con actividad lactásica del hongo Aspergillus oryzae, respecto a su actividad enzimática y la concentración de proteínas que contiene.
.
. -Cuantificar la actividad enzimática de un preparado enzimático comercial inmovilizado en un soporte (quitosano) midiendo su rendimiento de inmovilización, por medio de balances de concentración proteica yactividad enzimática.
.
. -Determinar los parámetros cinéticos del preparado enzimático ENZECO corp. Mediante la variación de concentración de sustrato e inhibidor.
.
-Afinar las habilidades técnicas en las prácticas de laboratorio, para así ir obteniendo resultados cada vez más precisos y exactos.
Revisión Bibliográfica
Acerca de Bradford:
La prueba para...
FACULTAD DE INGENIERÍA
ESCUELA DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA
Informe de Laboratorio: Cinética Enzimática
Felipe Pequeño Leclerc
Paola Rebolledo Leal
José Serrano Escudero
Profesor de asignatura: Zaida Cabrera
Lunes 6 de Septiembre de 2010
Introducción
Es sabido que las reacciones químicasnecesitan de cierta cantidad específica de energía para que ocurran. A la energía necesaria para que los reactivos formen el complejo activado se le llama energía de activación, Ea. Sin embargo, las reacciones pueden llevarse a cabo por medio de compuestos llamados Catalizadores, los cuales tienen como función disminuir la Ea necesaria para llevar a cabo la reacción. Podemos encontrar dos grandesgrupos de catalizadores: los inorgánicos y los biológicos, también llamados Enzimas. Es el comportamiento de estas últimas el tema principal del presente informe.
Las enzimas, en su estructura globular, se entrelazan y se pliegan una o más cadenas polipeptídicas, que aportan un pequeño grupo de aminoácidos para formar el sitio activo, o lugar donde se adhiere el sustrato, y donde ocurre lareacción. Una enzima y un sustrato solo formarán el complejo activado si su sitio activo coincide con el sustrato, lo que explica su altísima especificidad.
Las enzimas, como cualquier catalizador, presentan parámetros que definen su comportamiento en función de las condiciones en las que trabaja, el tipo de sustrato sobre el que actúa, concentraciones de sustrato, y de enzima misma, inhibiciones yotros factores que influyen directamente en la cinética enzimática. También, es posible inmovilizar las enzimas en un soporte con el fin de alargar su vida útil y de esta forma lograr una mayor producción con la misma cantidad de catalizador, lo que a largo plazo se traduce en un beneficio económico para las industrias.
En ámbitos prácticos, al momento de realizar una reacción con finesproductivos y catalizada mediante enzimas, se desea que el preparado enzimático adquirido tenga la mejor calidad. Para determinar esto, debemos cuantificar la actividad de la enzima. Se debe tener en cuenta que el preparado enzimático no se compone sólo de enzima, sino que además posee otros tipos de proteínas y compuestos varios que ayudan a su conservación, por lo que, además de los estudios de actividadenzimática, se llevará a cabo la estimación de cantidad de proteínas totales presentes en el preparado para corroborar qué cantidad de enzima propiamente tal hay presente y con ello tener un balance mas exacto en la producción.
En esta experiencia nos abocamos al estudio de la cinética enzimática, además de la concentración proteica de un preparado con actividad lactásica del hongo AspergillusOryzae, y dividiendo este tópico en 3 aspectos:
• Actividad de Enzima Soluble
• Actividad de Enzima Inmovilizada
Actividad de Enzima en presencia de inhibidor
Objetivos
Objetivo general
. -Comprender el comportamiento de las enzimas de forma empírica frente a distintos métodos de operación; soluble, inmovilizada e inhibida.
.
. Objetivos específicos
.
.-Caracterizar el preparado enzimático soluble ENZECO corp con actividad lactásica del hongo Aspergillus oryzae, respecto a su actividad enzimática y la concentración de proteínas que contiene.
.
. -Cuantificar la actividad enzimática de un preparado enzimático comercial inmovilizado en un soporte (quitosano) midiendo su rendimiento de inmovilización, por medio de balances de concentración proteica yactividad enzimática.
.
. -Determinar los parámetros cinéticos del preparado enzimático ENZECO corp. Mediante la variación de concentración de sustrato e inhibidor.
.
-Afinar las habilidades técnicas en las prácticas de laboratorio, para así ir obteniendo resultados cada vez más precisos y exactos.
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