bioensayo raton
Páginas: 9 (2124 palabras)
Publicado: 18 de marzo de 2014
METODOLOGIA PARA BIOENSAYO RATON
Lic. Jaime Alcides Romero Renderos
INTRODUCCION
La Marea Roja es un fenómeno natural producido por microalgas unicelulares presentes en el fitoplancton marino, que bajo condiciones favorables se multiplican causando una decoloración en el agua debido a los pigmentos que presentan.
La intoxicación en seres humanos, se origina por la ingestión demariscos, principalmente moluscos, La sintomatología de la intoxicación por consumo
de mariscos contaminados está condicionada por algunos factores, entre otros, la cantidad de mariscos consumidos, el nivel de toxinas de éstos, edad, contenido estomacal al momento de la ingesta del paciente, etc.
Se conocen varias toxinas asociadas al consumo de productos marinos, tales como: Toxina Paralizante (PSPo VPM). Toxina Diarreica (DSP o VDM). Toxina Neurotóxica (NSP o VNM). Toxina Amnésica (ASP o VAM). Ciguatera (CTX). Tetradotoxina (TTX)
En algunos países, la vigilancia de las aguas permite dar el primer aviso de mariscos latentemente tóxicos. Desde el punto de vista de la salud pública, la concentración de toxinas en pescados y mariscos es la clave de su determinación, para ello se requiere demuestreo para el análisis de animales indicadores y representativos . La prueba más utilizada es el bioensayo del ratón, en los últimos años, los análisis químicos han adquirido gran aceptación porque son mas rapidos, mas exactos y desde el punto de vista social son menos censurables que las pruebas animales. (Capó Martí, 2007)
En la actualidad los programas de control de la toxicidad enmariscos aun utilizan el bioensayo en ratón, este procedimiento fue desarrollado hace mas de 50 años. La Asociación de Químicos Analíticos Oficiales (AOAC) lo refinó y normalizó para contar con un método rápido y relativamente preciso para medir el contenido de toxinas PSP totales. El procedimiento consiste en inyectar 1 ml de extracto ácido del marisco a ratones de 20 gramos y registrar el tiempotranscurrido hasta la muerte del animal. (FAO, 2005)
METODOLOGIA PROPUESTA PARA EL BIOENSAYO DE RATON
MÉTODO BIOLÓGICO PARA LA DETERMINACION DE TOXINA PARALIZANTE PSP
El presente ensayo cuantitativo es aplicable a los análisis de toxinas PSP en moluscos, permitiendo la cuantificación de las toxinas en las muestras analizadas. El bioensayo en ratón permite ladeterminación de la toxicidad global producida por las toxinas PSP presentes en la muestra. El bioensayo se basa en el efecto toxico causado por un extracto acido de la muestra analítica, inoculado intraperitonealmente en ratones albinos de aproximadamente 20 g de peso.
El bioensayo en ratón permite la determinación de la toxicidad global producida por las toxinas PSP presentes en la muestra. Elbioensayo se basa en el efecto toxico causado por un extracto acido de la muestra analítica, inoculado intraperitonealmente en ratones albinos de aproximadamente 20 g de peso.
Las toxinas PSP se extraen en caliente mediante una maceración acuosa en medio acido de toda la carne del bivalvo previamente triturada. Posteriormente se inyecta 1 mL de extracto a cada uno de 3 ratones y se registra eltiempo de muerte (TM). Con los datos del peso del ratón, dilución del extracto y tiempo transcurrido hasta su muerte se calcula la toxicidad en unidades de raton (UR). Se define la UR como la cantidad de toxina que produce la muerte de un raton de 20 g en 15 min.
Equipos y materiales.
- Licuadora común.
- Balanza analítica digital.
- Plancha calefactora.
- Centrifuga.
- Potenciometro.- Timers.
- Termómetro digital.
- Vaso de precipitado de 600 mL
- Probetas de 100 y 250 mL.
- Pipetas graduadas de 5 y 10 mL.
- Vasos de licuadora de 500mL y de 1 lt.
- Varillas de vidrio o baguetas.
- Tijeras.
- Tubos de centrifuga Falcón de 50 mL
- Jeringas estériles descartables para insulina de 1 mL
- Espátulas y cucharas de acero inoxidable.
- Guantes descartables de látex.
-...
Lic. Jaime Alcides Romero Renderos
INTRODUCCION
La Marea Roja es un fenómeno natural producido por microalgas unicelulares presentes en el fitoplancton marino, que bajo condiciones favorables se multiplican causando una decoloración en el agua debido a los pigmentos que presentan.
La intoxicación en seres humanos, se origina por la ingestión demariscos, principalmente moluscos, La sintomatología de la intoxicación por consumo
de mariscos contaminados está condicionada por algunos factores, entre otros, la cantidad de mariscos consumidos, el nivel de toxinas de éstos, edad, contenido estomacal al momento de la ingesta del paciente, etc.
Se conocen varias toxinas asociadas al consumo de productos marinos, tales como: Toxina Paralizante (PSPo VPM). Toxina Diarreica (DSP o VDM). Toxina Neurotóxica (NSP o VNM). Toxina Amnésica (ASP o VAM). Ciguatera (CTX). Tetradotoxina (TTX)
En algunos países, la vigilancia de las aguas permite dar el primer aviso de mariscos latentemente tóxicos. Desde el punto de vista de la salud pública, la concentración de toxinas en pescados y mariscos es la clave de su determinación, para ello se requiere demuestreo para el análisis de animales indicadores y representativos . La prueba más utilizada es el bioensayo del ratón, en los últimos años, los análisis químicos han adquirido gran aceptación porque son mas rapidos, mas exactos y desde el punto de vista social son menos censurables que las pruebas animales. (Capó Martí, 2007)
En la actualidad los programas de control de la toxicidad enmariscos aun utilizan el bioensayo en ratón, este procedimiento fue desarrollado hace mas de 50 años. La Asociación de Químicos Analíticos Oficiales (AOAC) lo refinó y normalizó para contar con un método rápido y relativamente preciso para medir el contenido de toxinas PSP totales. El procedimiento consiste en inyectar 1 ml de extracto ácido del marisco a ratones de 20 gramos y registrar el tiempotranscurrido hasta la muerte del animal. (FAO, 2005)
METODOLOGIA PROPUESTA PARA EL BIOENSAYO DE RATON
MÉTODO BIOLÓGICO PARA LA DETERMINACION DE TOXINA PARALIZANTE PSP
El presente ensayo cuantitativo es aplicable a los análisis de toxinas PSP en moluscos, permitiendo la cuantificación de las toxinas en las muestras analizadas. El bioensayo en ratón permite ladeterminación de la toxicidad global producida por las toxinas PSP presentes en la muestra. El bioensayo se basa en el efecto toxico causado por un extracto acido de la muestra analítica, inoculado intraperitonealmente en ratones albinos de aproximadamente 20 g de peso.
El bioensayo en ratón permite la determinación de la toxicidad global producida por las toxinas PSP presentes en la muestra. Elbioensayo se basa en el efecto toxico causado por un extracto acido de la muestra analítica, inoculado intraperitonealmente en ratones albinos de aproximadamente 20 g de peso.
Las toxinas PSP se extraen en caliente mediante una maceración acuosa en medio acido de toda la carne del bivalvo previamente triturada. Posteriormente se inyecta 1 mL de extracto a cada uno de 3 ratones y se registra eltiempo de muerte (TM). Con los datos del peso del ratón, dilución del extracto y tiempo transcurrido hasta su muerte se calcula la toxicidad en unidades de raton (UR). Se define la UR como la cantidad de toxina que produce la muerte de un raton de 20 g en 15 min.
Equipos y materiales.
- Licuadora común.
- Balanza analítica digital.
- Plancha calefactora.
- Centrifuga.
- Potenciometro.- Timers.
- Termómetro digital.
- Vaso de precipitado de 600 mL
- Probetas de 100 y 250 mL.
- Pipetas graduadas de 5 y 10 mL.
- Vasos de licuadora de 500mL y de 1 lt.
- Varillas de vidrio o baguetas.
- Tijeras.
- Tubos de centrifuga Falcón de 50 mL
- Jeringas estériles descartables para insulina de 1 mL
- Espátulas y cucharas de acero inoxidable.
- Guantes descartables de látex.
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