Biokimica

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
BIOQUÍMICA

GUÍA PARA PRÁCTICA DE LABORATORIO No2

1. TEMA: PREPARACIÓN DE SOLUCIONES Y LECTURA ESPECTROFOTOMÉTRICA
2. OBJETIVOS:
3.1. OBJETIVOS GENERALES
* Preparar correctamente soluciones para la ejecución de prácticas de laboratorio.
* Aplicar la Espectrofotometría como una técnicacualitativa y cuantitativa de análisis.
3.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
* Realizar los cálculos teóricos mediante la aplicación de fórmulas y/ó factores de conversión, para en la práctica preparar soluciones a partir de solutos sólidos o líquidos aplicando normas de bioseguridad, utilizando correctamente materiales y equipos en el laboratorio.
* Analizar conceptos relacionados con laespectrofotometría, para entender su importancia como técnica de análisis bioquímico.
* Realizar la lectura de la Absorbancia de una banco de diluciones de orina en el espectrofotómetro y correlacionar los resultados con la concentración expresada en porcentaje y la transmitancia de cada muestra analizada.
3. MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS
* 1 gradilla
* 6 tubos de ensayopequeños limpios y secos.
* 1 pipetas graduadas de 5 y 10 ml
* 1 pera de succión
* 2 vasos de precipitación de 100 y 250 ml
* 1 balón aforado de 250 ml
* 1 varilla de agitación
* 1 probeta de 100 ml
* 1 espátula
* parafilm
* Espectrofotómetro,

* Balanza analítica.

* Acido Acético, Cloruro de sodio, Amoniaco
TRAER CADA GRUPO:
* Orina (unamuestra recogida en un recipiente estéril, las ¾ partes del chorro medio de la micción).
* Etiqueta (adhesivo multipek)
* 1 Envase de plástico limpio y seco 250mL (envasar solución preparada).

4. FUNDAMENTO TEÓRICO

ANÁLISIS BIOQUÍMICO
A) INTRODUCCIÓN
Un análisis bioquímico o clínico es la exploración complementaria de líquidos y/ó especímenes biológicos que permiten:interpretación de resultados, diagnóstico médico, valoración del pronóstico, valoración del tratamiento, investigación, ensayos clínicos, conocimiento de patologías, análisis del metabolismo.
El resultado de un análisis se interpreta frente a valores de referencia establecidos para cada población y requiere de una interpretación médica.
Por un lado está la prueba diagnóstica realizada y suresultado, y por el otro, la interpretación que el médico, respetando cada campo profesional.
Lo más importante es que al realizar un análisis, siempre se deben tener en cuenta ciertas características propias de una prueba diagnóstica. Algunos de estos aspectos clave son:
1. Exactitud: Grado de concordancia entre el resultado y un valor de referencia certificado. En ausencia deexactitud se tiene error sistemático.
2. Precisión: Grado de concordancia entre los datos obtenidos de una serie. Refleja el efecto de los errores aleatorios producidos durante el proceso analítico.
3. Sensibilidad: Capacidad para discriminar entre pequeñas diferencias de concentración del analito. Se evalúa mediante la sensibilidad de calibración, que es la pendiente de la curva decalibración a la concentración de interés.
4. Límite de detección: Concentración correspondiente a una señal de magnitud igual al blanco más tres veces la desviación estándar del blanco.
5. Selectividad: Cuantifica el grado de ausencia de interferencias debidas a otras especies contenidas en la matriz.
6. Seguridad: Amplitud de condiciones experimentales en las que puede realizarse unanálisis.
Las pruebas de laboratorio constituyen un factor fundamental en el diagnóstico, evaluación, tratamiento y pronóstico de la mayoría de las afecciones humanas.
Durante todo el procesamiento de la muestra, pueden ocurrir situaciones que se escapan al control, muchas veces por factores externos y otras por circunstancias propias del procedimiento, las cuales deben ser...