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Páginas: 9 (2107 palabras) Publicado: 1 de septiembre de 2014



Resumen:
La enzima amilasa es importante en estudios enzimáticas ya que participa en la digestión de carbohidratos en organismos eucariotas y procariotas. Esta enzima, hidrolitica, digiere el glicógeno y el almidón para así formar azucares más simples. En este laboratorio se dará a conocer la presencia de amilasa en tejido vegetal y saliva humana, su actividad enzimática y la historiaevolutiva de esta enzima en los organismos. Usando técnicas de electroforesis reacciones enzimáticas y colorimetría se mejor definió la actividad enzimática y comparación de estas. Se pudo observar bandas en las tres corridas de gel que significan que si hay presencia de amilasa, solo que difieren en cuanto a la concentracion de enzimas. La historia evolutiva de los organismos y las enzimaspuede ser estudiada mediante un árbol evolutivo. El árbol evolutivo presenta los cambios genéticos al mostrar las variantes de aminoácidos presentes en diversas secuencias de amilasa. Se preparó un BLAST para comparar la secuencia asignada (C), con otras seis secuencias y observer el transcurso evolucionario de dicha secuencia.

Introducción
La amilasa es una enzima que cataliza la hidrólisisentre enlaces alpha 1,4 en almidón.(4) Esta enzima ,en humanos, es producida en las glándulas salivales y páncreas. Tiene un rol importante en la digestión ya que ayuda a digerir carbohidratos en la boca. Igual esta enzima se encuentra en plantas u otros procariotas, importante en la historia evolutiva entre procariotas y eucariotas. El almidón es un polisacárido producido por plantas en forma dealmacenamiento de energía. Amilasa rompe los encases de los polímeros de almidón convirtiendo lo a un disacárido ,maltosa ,hasta llegar a su forma mas simple glucosa. El polisacárido de almidón esta compuesto por unidades de glucosa, amilasa y amilopectina.
Para estudios mas afondo sobre la enzima amilasa se estudiara la presencia de la misma y su actividad enzimática en el tejido del embriónde una habichuela, saliva humana, y la enzima pura. En este experimento se hará una electroforesis en gel de agarosa . La electroforesis es una técnica utilizada para la separación de proteínas o ácidos desoxirribonulceico (ADN) usando un gel de corrida y un campo eléctrico donde la molécula se moverá dependiendo de su carga y peso molecular a través del gel. El DNA, al ser lineal y de pornaturaleza tener carga negativa, migra hacia el polo positivo con mucho facilidad. Sin embargo proteínas pueden tener cadenas de aminos ácidos que le da cargas positiva, negativas o neutral. Por ende las proteínas se cargan con sustancias como el dodecilsulfato de sodio (SDS), que le da carga negativa a las proteínas dependiente del peso molecular, y así pueden migrar con mejor facilidad en elelectroforesis. El SDS es un detergente aniónico que además de darle carga negativa también desnaturaliza las proteínas dando les una conformación lineal. El SDS aunque sirve para conocer la presencia de enzimas es un limite para ellas ya que al desnaturalizar las enzimas pierden su actividad enzimática. Para corregir este problema y recuperar la conformación original de las enzimas se utiliza TritonX-100. Este detergente suave no iónico sustituye al SDS en las proteínas permitiendo así poder estudiar la actividad enzimática de la amilasa.
La amilasa a sido encontrada en organismos eucariotas como procariotas, lo cual da entender que la enzima presente proviene de alguna otra amilasa ancestral y se espera similitudes entre sus secuencias de aminoácidos. Esto nos permite hacer análisisevolutivos y hacer inferencias sobre las relaciones filogenéticas entre las diferente especies, y establecer analogías entre grupos de proteínas. También nos deja comparar las estructuras de las enzimas como sus sitios activos y la distancia entre átomos, que nos permiten crear modelos ilustrando y ver como se afecta la estructura y función de la moléculas si sucediese una mutación al ADN. Estas...
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