biologia celular

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE COAHUILA
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

Laboratorio de Biologia Celular



PRACTICA 3


OBSERVACIÓN DE PREPARACIONES DE AGUA CONTAMINADA
FRESCAS Y TEÑIDAS



Dr. Gerardo Sosa
Equipo no. 1

22/septiembre/2014



OBJETIVOS.
1 El alumno observará y aprenderá el uso adecuado del microscopio en preparaciones frescas y teñidas.
2 Aplicará algunastécnicas de tinción simple y diferencial sobre muestras biológicas de aguas contaminadas.
3 Será capaz de discernir entre las células procariontes y eucariontes en base al tamaño y tipo de tinción empleado.


INTRODUCCIÓN.
El agua del florero es ahora un lugar maravilloso para el desarrollo de pequeños organismos que quizás nunca se llegan a ver a simple vista, pero que probablemente, y deforma indirecta, se pueda apreciar su presencia. Se trata de microorganismos, es decir, organismos tan pequeños que solo pueden observarse utilizando un microscopio. Estos microorganismos, que ahora abundan en el agua del florero o en algún charco,  suelen ser generalmente de dos tipos:
-Protistas, denominados así ya que no son ni plantas, ni hongos, ni animales.
-Bacterias, que podemos encontrar engran número y de tipos muy diversos. Éstas últimas, aunque también son microscópicas como los protistas, poseen una diferencia fundamental con los protistas, carecen de un “núcleo” propiamente dicho, es decir, de un sitio delimitado donde se encuentre alojado el material genético o ADN.
La composición química de los organismos presenta una gran proporción de moléculas de agua en las células delos diversos tejidos. En la mayoría de ellos este fluido predomina y sólo en algunos su concentración es baja. Esta características es un factor muy importante para la observación microscópica, ya que debido a la refringencia del agua se dificulta observar los componentes estructurales de la célula. Para evitar este fenómeno se recurre a las técnicas de coloración; los colorantes tienen comofunción teñir los diferentes componentes celulares y tisulares para facilitar el observarlos. En biología son conocidos los primeros investigadores que usaron los colorantes. Se menciona entre ellos a Hill, quien en 1770 empleó el carmín; Ehrember utilizó en 1938 el índigo carmín, aplicándolo a organismos vivos. Sin embargo, ya en 1807 Schwarts introdujo la doble tinción utilizando el carminato de amonioy el ácido pícrico. Durante varios años las técnicas se limitaron al uso de estos colorantes, hasta que varios años después se descubrieron las anilinas, con las cuales las técnicas de coloración recibieron gran impulso. Los primeros investigadores que utilizaron las anilinas fueron: Beneke, en 1862, que usó la anilina violeta, y Waldeyer, en 1863, que empleo la fucsina.


MATERIAL.Frasco con agua contaminada.
Goteros (4 de 25 mL por grupo).
Portaobjetos (6 por equipo).
Cubreobjetos (6 por equipo).
Equipo para tinción de Gram que incluye cristal violeta (15 mL por grupo), lugol (15 mL por grupo), alcohol etílico (96%) (25 mL por equipo) y safranina (15 mL por grupo).
Colorante simple (azul de metileno, verde malaquita o fucsina ácida) (15 mL por grupo).
Aceite deinmersión (5 mL por grupo).
2 pipetas de 1 mL por equipo.
Microscopio óptico compuesto (1 por equipo).
1 mechero bunsen por equipo
Trapo de limpieza (personal).


METODOLOGÍA.
1 Limpiar y enfocar el microscopio.
2 Agitar la muestra de agua contaminada y tomar una pequeña gota de ésta. Colocarla en un portaobjetos e inmediatamente colocar encima un cubreobjetos.
3 Observar movimiento yforma de las células con los objetivos de 10x, 40x y 100x. No observar si el agua se secó.
4 En otro portaobjetos, añadir una pequeña gota de la muestra de agua y dejar secar. Esta laminilla será teñida con colorante simple. Esto se realizará colocando la laminilla con la muestra fijada al aire en las barras de vidrio colocadas en las tarjas del laboratorio. Añadir el colorante simple a la...