Biologia celular

TINCION Y FIJACION


TINCION Y FIJACION
La tinción es el proceso de coloración de las células o de los componentes celulares para que sea posible su observación atreves del microscopio. El objetivo de la tinción es la visualización de las células por medio de la coloración.
Los métodos de tinción se fundamentan en procesos fisicoquímicos muy complicados

CLASIFICACION DE LOSCOLORANTES SEGÚN SU GRUPOS AUXOCROMOS Y SU APETENCIA TISULAR:
BASICOS: son moléculas básicas que tiñen estructuras de tipo acido como los ácidos nucleicos. Dentro de este grupo estad las fishina básica, azul de metileno, azul de toluidina, verde de metilo,Etc.
ACIDOS: Son moléculas acidas que tiñen estructuras básicas, como el citoplasma, esta la eosina, eritrosina, etc.
NEUTROS: son sales cuyapropiedad colorante va unida tanto al colorante básico y como al acido y son el eosinato, azul de metileno, panóptico rápido.
COLORANTES INDIFERENTES: Diferentes solubilidades (características físicas); no tiñen por unión de una molécula u otra sino que son soluble a las sustancias que tiñen.
FIJACIÓN: Consiste en interrumpir los procesos degradativos, que aparecen tras la muerte de células,tratando de conservación la arquitectura y composición tisular lo mas próximo a la normalidad; la fijación debe ser inmediata; la fijación proporciona una imagen estática. Después de la fijación la muestra se deshidrata en concentración creciente de alcohol.


OBJETIVO GENERAL

* Reconocer las diferentes técnicas de tinción y fijación de células

OBJETIVOS ESPECIFICOS

*Identificar como actúa el azul de metileno en la levadura (10%)

* Conocer cono influye el verde janus en la observación de las células del epitelio bucal

* Reconocer como los leuco plastos asimilan el lugol mediante la tinción simple

* Observar la fijación de las bacterias mediante la tinción diferencial

MATERIALES | REACTVOS |
CUBREOBJETO | SOLUCION DE LUGOL |PORTAOBJETO | SOLUCION DE AZUL DE METILENO |
MICOSCOPIO | SOLUCION DE VERDE JANUS |
PLATANO | ACEITE INMERCION |
YOGUR | SAFRANINA |
PUENTE DE COLORACION | ALCOHOL ACETONA |
FRASCO LAVADOR | AGUA DESTILADA |
MECHERO DE ALCOHOL | CRISTAL VIOLETA |
PIPETA DE PASTEUR | |



METODOLOGIA

PROCEDIMIENTO 1: Se tomó unamuestra de levadura al 10% se coloco sobre el portaobjeto y se hizó un extendido. Luego se aplico una gota de azul de metileno, después de tres minutos se le agrego agua destilada y se espero hasta que se secara; se hizo el montaje en el microscopio y se observo con los objetivos 4X, 10X,40X.

PROCEDIMIENTO 2: Se tomó una muestra de epitelio bucal, se extendió sobre el porta objeto y se leaplico una gota de verde janus al cabo de tres minutos se le agrego agua destilada y se espero a que se secara, se hizo el montaje en el microscopio y se observo con el objetivo 40X.

PROCEDIEMIENTO 3: se tomó un bisturí y se hizo un frotis de pulpa de plátano y se coloco la muestra sobre el portaobjeto, seguidamente se hizo el montaje en el microscopio y se observo con los objetivos 4X, 10X, 40X.mas tarde se le agrego la solución de lugol en uno de los lados del cubreobjetvo y se esparció entre el cubre y portaobejto y se observo con los objetivos 4X,10X, 40X.

PROCEDIMIENTO 4: Se tomó una pequeña muestra de yogur y se coloco sobre el portaobjeto; se extendió sobre este, después se flameo para su fijación con la ayuda del mechero de alcohol, luego se coloco la lamina enzima delpuente de coloración, se aplico una gota de cristal violeta, se espero un minuto y seguidamente se lavó con agua destilada; se aplicó una gota de lugol por un minuto y nuevamente se lavó; mas tarde se le agrego alcohol acetona par su decoloración y se volvió a lavar con agua destilada; por último se aplico la safranina por unos 6 o 7 minutos aproximadamente y se lavo con agua destilada, después del...