Biologia molecular

Test de complementación genética o Prueba de Complementación Genética

Es una prueba que se usa para determinar si tendrá lugar o no la complementación (compensación en forma de dominancia) en una célula con un Fenotipo mutante dado cuando otro Genoma mutante, que codifica el mismo Fenotipo mutante, se introduce en dicha célula.
Test de Complementación o Test de Complementación CIS-TRANS serealiza para confirmar el sitio de la mutación.En la prueba de complementación, con una mutación conocida como referencia, una mutación desconocida se identifica.
En esta prueba, se colocan dos mutaciones en el protoplasma común o es configuración cis o trans. La prueba cis trans proporciona una definición operativa del gen como la unidad de la función de la unidad que controla la síntesis de unpolipéptido.
CIS -test
En este método, las dos mutaciones están siendo examinadas en un protoplasma común en configuración cis o de enganche, es decir, ambas mutaciones estarán en los mismos cromosomas. La prueba CIS se utiliza para averiguar si una mutación se da en el sitio de la mutación / gen o está en otro sitio. La prueba de la CEI es una prueba importante de control, que establece lavalidez de la prueba de correlación trans o complementación.
TRANS -test
En este método, las dos mutaciones que se están examinando se colocan en el protoplasma común, en configuración trans o de repulsión, ambas mutaciones estarán en cromosomas diferentes.
El concepto de funciones de prueba cis-trans es simple. Si se produce una mutación desconocida en una mutación genética conocida, entonces laprueba da un resultado negativo que no habrá producción de producto o tendremos un producto inactivado.
Si la mutación desconocida no se produce en el sitio de mutación genética conocida, entonces la prueba da un resultado positivo, es decir, habrá producción de los productos, porque sabemos que hay dos copias del gen.
Si un gen está mutado, el otro suplementará o codificará la proteína. Dado queambas mutaciones en los genes son diferentes, el otro gen tendrá la función de codificación de la proteína.
En el caso de una mutación que da un resultado negativo, no habrá producción de la proteína ya que ambos genes tienen la mutación.
En muchos casos, sólo serealiza la prueba trans para confirmar el sitio de la mutación, ya que la construcción de un heterocigoto cis lleva mucho tiempo y escostoso.
Para la prueba trans, un animal o células mutantes conocido se cruza con animales o células mutantes desconocidos para obtener una célula diploide que contiene las dos mutaciones en la configuración trans o de repulsión y se llama heterocigoto trans.
Los resultados de la prueba trans son totalmente indiscutible, cuando las mutaciones conducen a la proteína total o parcialmente defectuosao del producto totalmente abolido.
Este tipo de situación se presenta sólo cuando las mutaciones son causadas por deleciones, mutaciones de cambio de marco o mutaciones de terminación de la cadena.
El análisis se complica cuando las mutaciones son causadas por la sustitución que involucra nucleótidos diferentes, pero no hay alteración en la carga de aminoácidos, o el volumen de los aminoácidos.La información proporcionada por el test cis trans o test de complementación es totalmente distinta de la obtenida de los análisis de la recombinación.
Complementación y recombinación no debe confundirse, son diferentes y dan información diferente. Recombinación da la relación entre dos genes, mientras que la complementación da información sobre la posición de la mutación.
A pesar de que laprueba cis-trans es una técnica ampliamente utilizada y muy útil, tiene algunas desventajas:
1. No se puede utilizar cuando las mutaciones ocurren en genes dominantes o codominantes.
2. No se puede utilizar para análisis de mutaciones polares.
3. No se puede utilizar para la comprensión de los genes que no codifican para las proteínas difusible o queson utilizadas en el mecanismo de...