Biologia molecular
Páginas: 6 (1350 palabras)
Publicado: 25 de mayo de 2011
Uso del analisis de restRiccion en el control de calidad de cepa del biolarvicidad cubano BACTIVEC
Lic. Odelaisv Suarez-Moreno, Dra Grisel Montero Lagos, Dr Jorge Luis Maestre Mesa, Tec Manuel Diaz Perez y Est. Odisney Lugo Suarez
Rev cubana Med Trop v.56 n.2 Ciudad de la Habana Mayo-Ago, 2004
Introduccion:
El factor primordial para el control de muchas enfermedades tropicales es sinduda la lucha contra los mosquitos, vectores de los agentes causales de estas. en los ultimos años se ha intensificado el desarrollo de los biocontroles en la lucha contra estos insectos. entre estos productos los biolarvicidas sobre la base de Bacillus thuringiensis H-14 (Bt H-14) han tenido gran aceptacion con un impacto considerable en el control de enfermedades como la malaria, fiebre amarilla,dengue y la filariasis, que ocurren en el tropico donde las condiciones ambientales favorecen al vector.
En Cuba, la produccion y comercializacion del biolarvicida Bactivet, la realiza LABIOFAM S.A. siendo objeto de interes comercial en muchos paises. Para su introduccion en nuevos mercados se hace necesario presentar un aval de la pureza y estabilidad de la cepa, para ellos se empleandiferentes tecnicas bioquimicas y bacteriologicas y tambien pueden utilizarse tecnicas que brindan informacion sobre el comportamiento genetico,como es el caso del analisis con enzimas de restriccion del ADN comosomal.
Objetivo
Demostrar que la cepa empleada en el producto cubano, presenta identico patron genetico al de la cepa de referencia 266 de Bacillus thuringiensis del Instituto Pushkin delantiguo Leningrado y con ello aportar una herramienta mas para el control de calidad del producto.
Procedimiento
Se estudiaron 3 cepas 266 de Bacillus thuringienesis H-14, Una es la cepa de referencia de la coleccion del Instituto Pushkin del antiguo Leningrado y las otras 2 cepas fueron aisladas de diferentes lotes del biolarvicida que se elaboraron enlos años 2001 y 2002.
1- Secultivaron las cepas en caldo soja/triptona por 18 horas a 30ºC, lamasa bacilar fue concentrada por centrifugacion y se procedio a la extraccion del ADN cromosomal segun lo recomendado en el manual de laboratorio Molecular Cloning de Sambrook y otros.
2- El ADN cromosomal de cada cepa fue dirugido con las enzimas HindIII y EcoRI (Promega), para ello se realizo el enzayo siguiendo las recomendaciones delproveedor para cada enzima. La electroforesis del producto se llevo a cabo en gel de agarosa a 0.8% a 30V durante 16 hotas, al termino de las cuales se fotografio el gel que contenia los patrones de digestion obtenidos.
Resultados
Con el empleo de las enzimas de restriccion HindIII y EcoRI se logro obtener la digestion del ADN de las cepas estudiadas, con un unico patron para cada enzima.Estos resultados indican que las huellas geneticas de las cepas aisladas del producto se han mantenido y por otro lado estos patrones pueden ser utilizados como punto de comparacion para estudios posteriores.
DETECCION DE UNA MUTACION NO ESTANDAR EN EL PROTO-ONCOGEN RET POR MUTAGENESIS DIRIGIDA
Sebastian Real, Laura Gomez, Hector Perinetti , Luis S. Mayorga, Eduardo Pusiol, Maria Roque.Laboratorio de biologia celular y molecular, IHEM-CONICET, Instituto de la patologia de la tiroides, Facultad de Ciencias Medicas, Universidad Nacional de Cuyo, Mendoza.
Introduccion
El sindrome de neoplasias endocrinas multiples tipo 2A(MEN2A) es una enfermedad genetica que se caracteriza por el desarrollo de cancer medular de tiroides (CMT), feocromocitoma e hiperplasia de paratiroides.Esta enfermedad se hereda en forma autosomica dominante con una penetrancia muy elevada, desarrolandose en casi todos los individuos afectados CMT. la probabilidad de aparicion de feocromocitoma e hiperplasia de paratiroides es variable de familia en familia e incluso en algunos casos el CMT es la unica manifestacion del sindrome; se habla entonces de CMT y no de MEN2A. Tradicionalmente MEN2A se...
Lic. Odelaisv Suarez-Moreno, Dra Grisel Montero Lagos, Dr Jorge Luis Maestre Mesa, Tec Manuel Diaz Perez y Est. Odisney Lugo Suarez
Rev cubana Med Trop v.56 n.2 Ciudad de la Habana Mayo-Ago, 2004
Introduccion:
El factor primordial para el control de muchas enfermedades tropicales es sinduda la lucha contra los mosquitos, vectores de los agentes causales de estas. en los ultimos años se ha intensificado el desarrollo de los biocontroles en la lucha contra estos insectos. entre estos productos los biolarvicidas sobre la base de Bacillus thuringiensis H-14 (Bt H-14) han tenido gran aceptacion con un impacto considerable en el control de enfermedades como la malaria, fiebre amarilla,dengue y la filariasis, que ocurren en el tropico donde las condiciones ambientales favorecen al vector.
En Cuba, la produccion y comercializacion del biolarvicida Bactivet, la realiza LABIOFAM S.A. siendo objeto de interes comercial en muchos paises. Para su introduccion en nuevos mercados se hace necesario presentar un aval de la pureza y estabilidad de la cepa, para ellos se empleandiferentes tecnicas bioquimicas y bacteriologicas y tambien pueden utilizarse tecnicas que brindan informacion sobre el comportamiento genetico,como es el caso del analisis con enzimas de restriccion del ADN comosomal.
Objetivo
Demostrar que la cepa empleada en el producto cubano, presenta identico patron genetico al de la cepa de referencia 266 de Bacillus thuringiensis del Instituto Pushkin delantiguo Leningrado y con ello aportar una herramienta mas para el control de calidad del producto.
Procedimiento
Se estudiaron 3 cepas 266 de Bacillus thuringienesis H-14, Una es la cepa de referencia de la coleccion del Instituto Pushkin del antiguo Leningrado y las otras 2 cepas fueron aisladas de diferentes lotes del biolarvicida que se elaboraron enlos años 2001 y 2002.
1- Secultivaron las cepas en caldo soja/triptona por 18 horas a 30ºC, lamasa bacilar fue concentrada por centrifugacion y se procedio a la extraccion del ADN cromosomal segun lo recomendado en el manual de laboratorio Molecular Cloning de Sambrook y otros.
2- El ADN cromosomal de cada cepa fue dirugido con las enzimas HindIII y EcoRI (Promega), para ello se realizo el enzayo siguiendo las recomendaciones delproveedor para cada enzima. La electroforesis del producto se llevo a cabo en gel de agarosa a 0.8% a 30V durante 16 hotas, al termino de las cuales se fotografio el gel que contenia los patrones de digestion obtenidos.
Resultados
Con el empleo de las enzimas de restriccion HindIII y EcoRI se logro obtener la digestion del ADN de las cepas estudiadas, con un unico patron para cada enzima.Estos resultados indican que las huellas geneticas de las cepas aisladas del producto se han mantenido y por otro lado estos patrones pueden ser utilizados como punto de comparacion para estudios posteriores.
DETECCION DE UNA MUTACION NO ESTANDAR EN EL PROTO-ONCOGEN RET POR MUTAGENESIS DIRIGIDA
Sebastian Real, Laura Gomez, Hector Perinetti , Luis S. Mayorga, Eduardo Pusiol, Maria Roque.Laboratorio de biologia celular y molecular, IHEM-CONICET, Instituto de la patologia de la tiroides, Facultad de Ciencias Medicas, Universidad Nacional de Cuyo, Mendoza.
Introduccion
El sindrome de neoplasias endocrinas multiples tipo 2A(MEN2A) es una enfermedad genetica que se caracteriza por el desarrollo de cancer medular de tiroides (CMT), feocromocitoma e hiperplasia de paratiroides.Esta enfermedad se hereda en forma autosomica dominante con una penetrancia muy elevada, desarrolandose en casi todos los individuos afectados CMT. la probabilidad de aparicion de feocromocitoma e hiperplasia de paratiroides es variable de familia en familia e incluso en algunos casos el CMT es la unica manifestacion del sindrome; se habla entonces de CMT y no de MEN2A. Tradicionalmente MEN2A se...
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