biologia molecular

UNIVERSIDAD DE NARIÑO
FACULTAD DE CIENCIAS AGRICOLAS
PROGRAMA DE INGENIERIA AGROFORESTAL

ASIGNATURA: BIOLOGIA MOLECULAR
ELECTROFORESIS
PRESENTADO A: OSCAR CHECA CORAL
PRESENTADO POR:
ADRIANA YOREDY GOMEZ
MARCELA ALBAN


RESUMEN

En esta práctica se realizó en el laboratorio de sanidad vegetal, Universidad de Nariño, donde se utilizó el ADN de maíz (Zea maiz), extraído con elmétodo de extracción de ADN DOYLE Y DOYLE, para realizar electroforesis este es un método de laboratorio en el que se utiliza una corriente eléctrica controlada con la finalidad de separar biomoléculas según su tamaño y carga eléctrica a través de un gel de agarosa para realizar análisis de ADN, aquí se obtuvo como resultado


PALABRAS CLAVES. , biomoléculas, gel de agarosa, carga eléctricaINTRODUCCION
La electroforesis en gel de agarosa es un procedimiento utilizado en varias áreas de la biotecnología, este método analítico se lleva a cabo en laboratorios de investigación, biomédicos y forenses, en altas condiciones de esterilidad.
Se emplea para separación de biomoléculas que sirve frecuentemente para analizar fragmentos de ADN generados por enzimas de restricción, PCR,etc. También se utiliza para separación de otras biomoléculas como colorantes, ARN y proteínas. Existen algunos 2 tipos de electroforesis en gel de agarosa fundamentalmente que son la electroforesis horizontal; que es el más utilizado para separar moléculas de ADN y la electroforesis vertical se utiliza para separar proteínas y utiliza geles de poliacrilamida.
El instrumento de electroforesishorizontal es esencialmente una caja con electrodos en cada extremo, estos electrodos son de platino ya que tiene una conductividad eléctrica muy buena, debido a que los electrodos de platino son caros y frágiles se debe tener cuidado cuando se manejan equipos de electroforesis.
Esta técnica ha contribuido en la ciencia con muchos avances tecnológicos, por sus amplias aplicaciones en varios camposcomo la medicina forense, biotecnología, etc.
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
El objetivo de este experimento es ampliar los conocimientos precisos sobre la electroforesis. través de la practica en el laboratorio.
OBJETIVOS ESPECIFICOS
Conocer y familiarizarse con todo lo que implica esta técnica de separación de biomoléculas llevada a la práctica.

Aprender sobre las adecuadas condiciones enlas que se debe realizar el procedimiento
Obtener la separación de las biomoléculas de ADN obtenido previamente en el laboratorio anterior, el cual servirá para realizar análisis.
MATERIALES Y METODOS
Muestra de ADN obtenida previamente
Cámara de electroforesis
Una micropipeta.
Buffer TB
Bromuro de etidio
Buffer de carga


ADN extraído de maíz

METODOLOGIA

Para la electroforesiscon ADN se realizo lo siguiente

1. Preparación de agarosa al ‘-8%
2. Se preparó la cámara de electroforesis


Fig. 1 (Preparación de cámara de electroforesis)

3. Se adicionó buffer TBE al gel, este debe quedar sumergido totalmente dentro de la cámara


Fig. 2 (Adición de buffer TB)

4. Se colocó en el papel parafin 8 puntos de bromuro de etidio, cada uno una cantidadde 1 microlitro



Fig. 3 (Bromuro de etidio)

5. Con ayuda de la micropipeta al bromuro de etidio se le agregó 1 microlitro de buffer de carga.


Fig. 4 (Adición de buffer de carga)

6. Se le adicionó 5 microlitros de la muestra de ADN, posteriormente a esto se mezcló.


Fig. 5 (Adición de la muestra)

7. Esta solución fue llevada a los pocillos. Este proceso fue realizadorepetidamente por los 8 diferentes grupos de laboratorio.

Fig.6 (Paso de la muestra a la cámara de electroforesis)

8. Finalmente después de colocada la muestra de ADN en el agar, se le aplico carga eléctrica esto se llevó a él revelado


Fig. 7 (Aplicación de carga eléctrica)

RESULTADOS

Del proceso anterior se obtuvo los siguientes resultados

1. Cálculos para...