Biologia Molecular

CASO
Una pareja acude al médico con su hijo varón de 6 meses para evaluar su apatía, mal control de la cabeza y la mirada fija. Se determina que tiene la enfermedad de Tay-Sachs, un transtornohereditario autosómico recesivo. La pareja tiene además una hija. En el diagrama siguiente se muestra el árbol genealógico de esta familia. Además las transferencias Southern del análisis de polimorfismopor longitud de fragmentos de restricción (RFLP), ligados muy estrechamente al gen de la Hexosaminidasa A, que es defectuosa en la enfermedad de Tay-Sachs.
1) Completa el árbol genealógico de lafamilia indicando el estado homocigoto mutado, homocigoto normal o heterocigoto (Portador), de cada uno de los miembros de la familia.
PISTA: El hijo está enfermo y es enfermedad recesiva autosómica.Fíjate en el tamaño y numero de las bandas del Southern.

2) El polimorfismo analizado por RFLP, emplea una enzima de restricción que genera dos bandas en los padres (3Kb y 4Kb respectivamente)y bandas únicas en hijo (3Kb) e hija (4Kb).
¿Cuál de las siguientes aseveraciones es cierta?
a. El polimorfismo ligado a la enfermedad carece del sitio de restricción para la enzimautilizada.
b. Solo el alelo normal presenta el sitio de restricción para la enzima utilizada.
c. La presencia del polimorfismo ligado a la enfermedad genera un sitio de restricción y por eso elhijo tiene una banda más pequeña en el Southern.
d. La hija está sana porque la enfermedad está ligada al cromosoma X y solo enferman los varones.
EJERCICIO:
Eres un investigador en el áreade la Biología Molecular y sospechas que en el cáncer de próstata el gen de la proteína p53 (supresor de tumores) tiene una expresión disminuida con respecto al tejido normal.
1. ¿Qué técnicamolecular emplearías para comparar la cantidad de proteína p53 producida en tejido normal y tejido canceroso?
Western Blot
2. ¿Qué técnica utilizarías para comparar los niveles de expresión...