Biologia Molecular2


Practica: 1 ADN
materia:
Biologia molecular
Introducción
La práctica la pudimos realizar en el salón de clases., debido a que la extracción de ADN requiere hacer varias series de etapas básicas. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. Después debe romperse igual la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Porúltimo hay que proteger el ADN de enzimas que puedan disminuirlo y para aislarlo hay que hacer que se precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interface entre el alcohol y el agua. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa. La salevita la unión de las proteínas al ADN.
Objetivos
-Realizar la extracción de ADN de chicharos ya que contienen una gran cantidad de ADN.
- Observar la estructura fibrilar del ADN.
- Establecer la relación entre el proceso de extracción y propiedades qu?mico-f?sicas del ADN
Material necesario
- lata de chincharos.
- Agua fría (destilada o mineral)
- Sal de mesa
- sal d mesa
- Detergente líquido ochampú
- Alcohol
- Batidora
- Colador o centrífuga
- Vaso
-ablandador de carne.
Procedimiento
1-para el experimento utilizamos chincharos ya que contienen una gran cantidad de ADN
-En la licuadora colocamos una lata de chincharos, lo licuamos por 15 segundos, una cucharada de sal, y agua fría. (para poder separar las células que contienen los chincharos) (No usar agua del grifo.)
-Em un recipientey colador vertir la mezcla y desechar lo que queda en el colador ,
--colocar 2 cucharadas de detergente líquido o champú y agitarpara mezclar.
-Agregar una pizca de ablandador de carne, esto nos srvira como enzima
-agrgar alcohol (igual al volumen de la mezcla).


Resultados y explicación
El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro ya que, entremezclado con él, hayfragmentos de ARN. Una extracción "profesional" se realiza añadiendo enzimas que fragmentan las moléculas de ARN e impiden que se unan al ADN.
Para realizar una extracción pura ocurrirá que el detergente contiene lauril sulfato de sodio, el cual limpia los trastes removiendo grasas y proteínas. Éste actúa de la misma manera en el protocolo de extracción de ADN, separando las grasas (lípidos) y lasproteínas que constituyen las membranas que rodean la célula y el núcleo. Una vez que estas membranas se han roto, el ADN es liberado de la célula
El calor suaviza los fosfolípidos (grasas) en las membranas que rodean la célula y el núcleo. También desactiva (desnaturaliza) a las enzimas desoxirribonucleicas (ADNasas) las cuales, si están presentes, pueden cortar el ADN en pedazos tan pequeños que loharía imposible de ver. Si las enzimas se desnaturalizan y el ADN se desenrolla, éste pierde su forma y se vuelve inactivo. Las enzimas se desnaturalizan a 60° Celsius y el ADN se desnaturaliza a 80° Celsius.
La solución ablandadora de carne actúa como una enzima, que contribuye a eliminar las proteínas que puedan contaminar el ADN.
El ADN se precipita en el alcohol fuera de la solución, donde puedeser visto. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa.
El proceso de extracción de ADN desde una célula es el primer paso para muchos procedimientos (protocolos) de los laboratorios de biotecnología.
Los científicos deben ser capaces de separar suavemente el ADN de sustancias no deseadas que se encuentranen las células, evitando que el ADN se desnature (que se rompa).
El material que se necesita para ello es fácil de encontrar y el procedimiento es sencillo .Cada uno de los ingredientes tiene su propia función. La solución de sal y jabón sirve para romper la membrana plasmática y nuclear e incluso la pared celular. El líquido de lentillas elimina las proteínas que degradan el ADN. El alcohol...