Biologia

Introducción al cultivo de tejidos

1. Introducción histórica
En el siguiente cuadro se muestran algunos de los hechos históricos más relevantes en el desarrollo de las técnicas y métodos de cultivo de tejidos

1885 Roux Consiguió mantener durante días células de embrión de pollo en una solución salina
1907 Harrison Utilizó técnicas de estudio in vitro para el estudio de fenómenos in vivo,y demostró el
crecimiento de fibras nerviosas en cultivo
1910 Burrows Empleó plasma de pollo para nutrir los cultivos embrionarios de pollo
1913 Carrel Demostró la posibilidad de mantener en cultivo células de embrión de pollo, en
condiciones de asepsia, durante un tiempo superior a la vida del animal
1916 Rous y Jones Utilizaron por primera vez extractos enriquecidos en tripsina paradisociar células de
los tejidos
1948 Sanford y cols. Demuestran la formación de clones celulares
1952 Gey y cols. Establecen la primera línea celular humana contínua, las células HeLa
Levi-Montalcini y cols. Determinan que el factor de crecimiento nervioso (NGF) estimula el crecimiento de
axones en cultivo
1954
Abercrombie y cols. Observan la inhibición de crecimiento por contacto en fibroblastos1955 Eagle Desarrolla medios definidos y describe factores de adhesión
1958 Temin y Rubin Desarrollan un ensayo cuantitativo para la infección de células de pollo en cultivo por
el virus del sarcoma de Rous
1961 Hayflick y Moorehead Describen la vida finita de las células humanas diploides
1962 Buonassisi Publica los métodos para mantener células diferenciadas
1964 Littlefield Introdice elmedio HAT para el crecimiento selectivo de células híbridas, y desarrolla
las técnicas de fusión celular
Ham Utiliza el primer medio 1965 definido libre de suero
Harris y Watkins Producen el primer heterocarion de células de mamífero por la fusión inducida por
virus de células humanas y de ratón
1968 Yaffe Estudia la diferenciación de mioblastos normales in vitro
1969 Augusti-Tocco y SatoEstablecen la primera línea celular estable de neuroblastoma, línea de celulas
diferenciada
1975 Köhler y Milstein Establecen la primera línea celular productora de anticuerpos monoclonales
1976 Sato y cols. Publican una serie de trabajos que demuestran las distintas necesidades de
hormonas y factores de crecimiento que precisan diferentes líneas celulares
1977 Wigler y Axel Desarrollan unmétodo eficiente para introducir una copia simple de genes de
mamífero en células en cultivo
1986 Martín y Evans Aíslan y cultivan células madre embrionarias pluripotenciales del ratón
1998 Thomson y Gearhart Aíslan células madre embrionarias humanas

2. ¿Qué entendemos por cultivo de tejidos?
Podemos decir que es el conjunto de técnicas que nos permiten mantener células in vitro con una granaproximación a sus propiedades y funciones in vivo.

Dependiendo del grado de preservación de la estructura del tejido u órgano de origen y del tiempo de su duración distinguimos diferentes tipos de cultivos: de órganos, explantes, primarios, secundarios, etc.

El término “cultivo de tejidos” suele ser usado como un término genérico que incluye el de cultivo de órganos y el de cultivo de células.2.1 Tipos de cultivos de tejidos
? Cultivo de órganos: En este tipo de cultivo la organización tridimensional del órgano in vivo se mantiene, aunque sólo sea parcialmente, y mantiene todas o algunas de las características histológicas del tejido original. El órgano o porción del mismo se mantiene en un medio líquido del que extrae los nutrientes y al que elimina los desechos metabólicos. Losdiferentes tipos de células se mantienen en su forma diferenciada y constituye una buena réplica del órgano original. Pero, sin embargo, generalmente no permite la propagación, ya que el crecimiento de células se produce únicamente en la periferia. Normalmente este tipo de cultivo es difícil de mantener durante un tiempo prolongado debido a las diferencias potenciales de crecimiento de los...