biologia
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Diversidad”
Universidad Nacional de Ingenier´
ıa
Facultad De Ciencias
Periodo 2011 - III
Biolog´
ıa(CH-061)
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TRABAJO PRACTICO No 1
TEMA:
Observaci´n de Bacterias y la Tinci´n Gram (tinci´n diferencial)
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FECHA:
26 de Enero de 2012
ALUMNOS:
BURGA Guardales, Carlos
COD: 20032152E
CHUQUIANOAgreda, Jes´s
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COD: 20032169E
MESTANZA Matheus, Jimmy
COD: 20040439H
MOLINA Tarazona, Lucy
COD: 20021307B
MORENO Capristano, Maritza
COD: 20030206K
(CH-061) - Biolog´
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Lic. GARC´ Avelino, Pilar
IA
1.
Objetivos
Conocer y aplicar la t´cnica de Tinci´n Gram para poder visualizar bacterias Gran
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positivas y Gram negativas.
Emplear t´cnicasbacteriol´gicas simples.
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Conocer el fundamento estructural de la Tinci´n de Gram.
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Utilizar colorantes y comprender su utilizaci´n.
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2.
Fundamento Te´rico
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En las ultimas d´cadas se han hecho importantes avances en el estudio de la ul´
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traestructura bacteriana, logr´ndose una identificaci´n bioqu´
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ımica de muchas fracciones
subcelulares; estos avances han permitidoubicar a las bacterias en el reino procariota
(pro de primitivo y cariota de n´cleo).
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El conocimiento de las diferentes estructuras y composici´n ha permitido comprender
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como muchas bacterias se relacionan con el hombre, ya sea como integrantes de la flora
normal o como agresoras para el mismo.
Las bacterias se presentan con una morfolog´ definida que est´ determinada por su
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apared r´
ıgida. Se pueden presentar como esf´ricas, ovaladas, denomin´ndose cocos. Si la
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forma es cil´
ındrica se denominan bacilos o bastones, estos bastones pueden ser rectos,
curvos o con forma de espiral, en este ultimo caso les llamamos espirilos (Figura 1).
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Figura 1: Clases de bacterias.
La morfolog´ bacteriana debe ser observada con el microscopio ´ptico o el microsıa
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copioelectr´nico, dado el tama˜o peque˜o de estos microorganismos. El m´s usado en
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el laboratorio es el microscopio ´ptico de campo claro, pero existen otros como el mio
croscopio ´ptico de campo oscuro en los que los organismos aparecen brillantes en fondo
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oscuro. Este microscopio permite la visualizaci´n de bacterias dif´
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ıciles de colorear como
el Treponema pallidum,agente de la s´
ıfilis.
Las tinciones son t´cnicas que permiten observar microorganismos en funci´n de la
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capacidad de los mismos para retener o no determinadas sustancias colorantes, lo que
depende de la carga de la c´lula y del colorante. Los colorantes pueden ser de distintos
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tipos:
Cati´nicos. Son sustancias que tienen carga positiva. Penetran en el interior de las
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c´lulas ylas ti˜en. Ejemplos: azul de metileno, cristal violeta, safranina.
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Ani´nicos. Con carga negativa. No penetran en el interior celular, de modo que no ti˜en
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las c´lulas, sino el entorno. En este caso se habla de tinci´n negativa. Ejemplos:
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eosina, nigrosina.
Liposolubles. Se mezclan con los l´
ıpidos celulares y los ti˜en. Ejemplo: negro sud´n.
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Las tinciones pueden ser:Simples. Utilizan un solo colorante. Se basan en el hecho de que las c´lulas tienen
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una composici´n qu´
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ımica diferente a la de su entorno, de modo que ambos se
comportan de forma diferente frente a un colorante. El colorante ti˜e las c´lulas
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(azul de metileno, safranina) o no (nigrosina).
Diferenciales. Se basan en el hecho de que distintos tipos de c´lulas tienen distinta
ecomposici´n qu´
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ımica, y por lo tanto reaccionan de forma diferente frente a una
tinci´n, lo que permite clasificar los microorganismos en diferentes grupos, seg´n
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su capacidad de tinci´n. En este apartado est´n dos tinciones de importancia
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taxon´mica y m´dica: la tinci´n de Gram y la de ´cido-alcohol resistencia (de
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Ziehl-Neelsen). Estas tinciones utilizan m´s de...
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