Biologia

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Requisitos para el estudio del cariotipo
Ante todo, deben guardarse las máximas condiciones de esterilidad. Además, debe cumplirse lo siguiente:* Las células deben encontrarse en división. Para ello, se hará la incubación de la muestra en presencia de productos inductores de la mitosis (mitógenos), como es el caso de fitohemoaglutinina.* Las células deben pararse en prometafase, empleando colchicina, la cual interfiere en la polimerización de los microtúbulos del huso mitótico.
* Con el objetivo de conseguir una buenaseparación cromosómica, las células deben someterse a choque osmótico. Para ello, se emplea un medio hipotónico (0,075M KCl), que ocasiona el aumento de volumen de las células.
* Las células tienen que serfijadas.
* Hay que proceder a la tinción de los cromosomas para que sean identificables.
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-------------------------------------------------Método de estudio del cariotipo
* Toma de sangre periférica y separación de los glóbulos blancos (linfocitos T)
* Incubación en presencia de productos que inducen a la mitosis (mitógenos), comola fitohemoaglutinina
* Detención de la mitosis en la metafase (utilizando colchicina, que interfiere en la polimerización de los microtúbulos del huso mitótico)
* Paso por un medio hipotónicoque hace que las células se hinchen
* Depositar una gota de la preparación entre porta y cubre (sobre el cual se hace presión para dispersar los cromosomas)
* Fijar, teñir y fotografiar losnúcleos estallados (10-15; 30 en mosaicos). Se miran de 10 a 15 núcleos porque puede haber muchos falsos positivos debido a que le hemos añadido mitógenos (de manera que las células se dividen de formarápida y precipitada) y colchicina, los cuales pueden provocar mutaciones e irregularidades en los cromosomas. Si los 10-15 núcleos no son iguales puede ser debido a estas sustancias o a que nos...