biologia

3. CULTIVO DE LINFOCITOS DE SANGRE PERIFÉRICA PARA CARIOTIPO UTILIZANDO LA TÉCNICA DE BANDAS G.

3.1 MATERIALES Y REACTIVOS.

-Medio de cultivo PB MAX TM karyotyping (adicionado con fitohemaglutinina, antibióticos, glutamina).
-Campana de siembra esterilizada con Dermo MR DINE Espuma Antiséptico y Germicida y alcohol.
-Material biológico. Obtener Muestra de sangre periférica 1 ml,aproximadamente; con jeringa estéril heparinizada.

Nota: En caso de que se utilice el medio Mc COY preparar lo siguiente:
Mc COY 100 ml
Antibiótico y antimicótico 1 ml
Fitohemaglutinina (PHA) 2 ml
Sangre del paciente 0.3- 0.5 ml

NOTA: Solo se podrá realizar la toma de muestra para cariotipo los días lunes, martes y viernes, depreferencia de 7:00 a.m. a 9:00 a. m., debido a las 72 horas de incubación que requieren las muestras.
3.1.1 TOMA DE MUESTRAS PARA CARIOTIPO
Los pacientes se deben presentar sin estar recibiendo ningún tipo de terapia farmacológica, radioterapia, transfusiones o tener un cuadro infeccioso.
Se utiliza material estéril y desechable para obtener la muestra sanguínea por punción venosa.
Lospacientes que no cumplan con estas condiciones serán citados nuevamente.



3.1. 2 PROCEDIMIENTO
Alicuotar el medio de cultivo en tubos de ensaye estériles. Colocar 5 ml en cada tubo y etiquetar cada tubo de ensaye con el medio indicando el nombre del medio, la fecha de alícuota y lote. Mantenerlos en el refrigerador hasta el tiempo de sembrar las muestras.
Al momento de sembrar:Etiquetar dos tubos de ensaye con medio por cada paciente.
En condiciones estériles, agregar a cada tubo 0.9 ml de sangre y etiquetar cada tubo con el numero del respectivo paciente.
Invertir suavemente el tubo para mezclar la sangre.
Incubar las muestras sembradas en la incubadora a 37ºC durante 72 horas.
LINFOCITOS
Linfocito, grupo especial de glóbulos blancos; son las células de lasangre que intervienen en los mecanismos de defensa y en las reacciones inmunitarias del organismo.





Contenido
•1 Funciones de los linfocitos
•2 Tumores
•3 Categorías de los Linfocitos
•4 Fuente


Funciones de los linfocitos

Los linfocitos participan en la lucha contra los microorganismos extraños y los tumores. También son responsable del fenómeno del rechazo de losórganos trasplantados.

Tumores

Los tumores se clasifican en benignos o malignos, aunque esta distinción no tiene utilidad universal. La propiedad más importante de un tumor maligno es su capacidad de invadir tejidos vecinos o distantes. La diseminación a tejidos lejanos, que suele tener lugar a través de la sangre o de los vasos linfáticos, se denomina metástasis y es característica delcáncer.

Algunos tumores benignos pueden ser mortales sin producir metástasis. Entre ellos los más importantes son los tumores cerebrales llamados gliomas, que llegan a crecer lo suficiente como para ejercer gran presión sobre las estructuras cerebrales vecinas y destruir la función respiratoria. Un tumor hepático puede ser mortal al destruir las funciones vitales de este órgano, incluso sinmetastatizar.

Categorías de los Linfocitos

Hay dos grandes categorías de linfocitos: B y T.
1.Los linfocitos B, que representan entre el 10 y el 20% de la población total, circulan en la sangre y se transforman en plasmocitos productores de anticuerpos en caso de infección. Son responsables de la inmunidad humoral.
2.Los linfocitos T se dividen a su vez en dos grupos que desempeñan funcionesdistintas:
•Los linfocitos T killers (células asesinas o supresoras) son activados por células anormales (tumorales o infectadas por virus); se fijan a estas células y liberan sustancias tóxicas (linfoquinas) para destruirlas.
•Los linfocitos T helpers (cooperadores) estimulan la actividad de los T killers e intervienen en otros aspectos variados de la reacción inmunitaria. El VIH, virus...