biologia

Extracción de DNA desde células
epiteliales humanas y desde tejido vegetal

Nombre: Ana Victoria Fuentealba
Jorquera
Ramo: Biología Molecular
Profesores: Carlos Gaete
Daniela Urbina
Ayudantes: Gonzalo Sepúlveda
José Carlos Caris
Fecha de entrega: 27 de septiembre de 2013

I.

Introducción

El ADN o también llamado ácido desoxirribonucleico es el material
genético que presentantodos los organismos vivos, es el que contiene
la información genética de un individuo o ser vivo, es también una de las
macromoléculas esenciales, el que codifica los genes de las células, El
ADN está formado por una larga secuencia de nucleótidos, cada
nucleótido contiene 4 bases nitrogenadas, propias del ADN, estas son;
adenina, timina, citosina y guanina, la información que contiene elADN
es única e irrepetible en cada ser, ya que la combinación de elementos
se construye de manera única.
El ADN podría describirse como una compleja cadena de polímeros,
polímeros que están entretejidos de manera doble por enlaces puente
de hidrogeno.
El descubrimiento del ADN ha permitido que muchos científicos
comenzaran a investigar, hay avances científicos que tienen como
objetivomejorar las condiciones de vida de los seres vivos. Entre estos
logros se puede mencionar los de la genética y en las investigaciones
forenses, pero además también en informática ya que en los sistemas
de este tipo se aplican algunos elementos relativos a la composición del
ADN. Sin duda el descifrar de manera completa la composición del ADN
el ser humano produjo uno de los avances másimportantes de la
historia, pudiendo tener acceso a la misma estructura de cada individuo
a nivel genético.
En este practico extraeremos el ADN de dos tipos de células, animales y
vegetales, ¿Pero para que se realiza esta extracción? O ¿Por qué es
tan importante realizar esto?, la respuesta no es tan sencilla pero tiene
lógica, el ADN se extrae de la célula para ser analizada, esto a lo largo
de lahistoria ha ayudado a casos criminales, casos de paternidad, o
para determinar enfermedades. El descifrar el contenido de ADN a
permitido desbloquear caracteres hereditarios y caminos ancestrales,
las pruebas han ayudado a identificar cuerpos que no se podían verificar
de otra manera.
Para la extracción de ADN se usan maquinas especiales, así cada una
facilita el proceso. A continuación sedetallara el proceso para realizar la
extracción del ADN.
Los objetivos de este practico son que conozcamos herramientas que
ayudan a la extracción de ADN, y de esa manera comprendamos el por
qué se utiliza cada máquina, además aprenderemos a interpretar
resultados.

II.

Materiales y métodos
II.a Extracción de DNA genómico desde tejido hojas de Frutilla
Chilena

Primero se picauna pequeña porción de hoja de la frutilla blanca, y se
mete dentro de un tubo de 1,7 ml, con una punta de teflón en presencia de un
buffer se muele hasta que se vean trozos chicos, se mezcla por inversión del tubo
y se pone en el interior de la centrifuga a máxima velocidad en microcentrífuga por
5 min a temperatura ambiente, el sobrenadante se transfiere a un tubo que
contenga isopropanol,se mezcla por inversión varias veces, y se centrifuga
nuevamente durante 5 minutos, posteriormente se descarta el sobrenadante, se
agrega un ml de etanol al 80% preenfriado, se mezcla por inversión del tubo, se
descarta el sobrenadante nuevamente y se deja secar el tubo invertido sobre una
toalla nova.
II.b Extracción y purificación de DNA a partir de células epiteliales
humanas.
Primero sedebe realizar un enjuage bucal utilizando 15 ml de solución
salina normal (NaCl 0,9%), se vierte el contenido de la boca a un tubo de
centrifuga de 50 ml, se transfiere a un tubo de 15 ml, se centrifuga por 5 minutos a
5.000 rpm, se elimina el sobrenadante por inversión del tubo, y se resuspende el
sedimento colectado en 3 ml de solución de lisis y mezcle por inversión, se debe
incubar la...