biologia

LA MICROSCOPÍA:
HERRAMIENTA PARA ESTUDIAR CÉLULAS Y TEJIDOS

CAPÍTULO 5
EL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO.
5.1.-Nociones elementales
5.2.-Técnicas de microscopía electrónica
5.2.1.-Diseño del microscopio electrónico de transmisión
5.2.2.-Diseño del microscopio electrónico de barrido
5.3.- Formación de la imagen en los microscopios electrónicos
5.4.-Poder de resolución: Aumentos5.5.-Preparación de los especímenes. Contraste. Aplicaciones
5.5.1.-Microscopía electrónica de transmisión
5.5.2.-Microscopía electrónica de barrido
5.6.-Microfotografía electrónica: Interpretación de las imágenes

5.7.-Semejanzas y diferencias entre la microscopía electrónica y la microscopia de luz
5.7.1.-Semejanzas (fig. 5-12):
• Diseño y funciones de sus elementos.
• En relación al sistema deiluminación: La radiación empleada incide directamente sobre la muestra en estudio. Está conformado por una fuente emisora de la radiación y un condensador que enfoca el rayo sobre el preparado histológico.
• El espécimen se coloca entre el sistema de iluminación y los objetivos o sistemas de formación de la imagen.
• En relación al sistema óptico: Las lentes acopladas producen una imagen aumentadadel espécimen en estudio. Conformado por una lente objetivo que forma una imagen intermedia y la lente proyectora (ocular, en el caso del microscopio fotónico) que a su vez aumenta la imagen intermedia para formar la imagen aumentada final.
• Pueden convertir la radiación empleada en una imagen permanente (microfotografía).
 
 
 
5.7.2.-Diferencias: Tabla 5-2
Elemento
Microscopio fotónicoMicroscopio electrónico
LENTES
De cristal o vidrio, con distancias focales fijas
 
 
Magnéticas, a partir de metales magnéticos, alambre de cobre enrollado, cuya distancia focal varía en relación con la corriente que pasa por la bobina de cobre
AUMENTO
Se consigue cambiando los objetivos, rotando el revólver
 
El aumento del objetivo es fijo (distancia focal) mientras que la distanciafocal de la lente proyectora varía para lograr los aumentos
PROFUNDIDAD DE CAMPO
Pequeña, por lo que se pueden ver diferentes planos de enfoque al mover el tornillo micrométrico
Mayor, por lo que se puede ver enfocado todo el espesor del corte ultrafino del espécimen
 
FUENTE DE LA RADIACIÓN
Haz de luz: fotones. Generalmente situada por debajo del espécimen (aunque hay excepciones)
Haz deelectrones. 
Ubicada siempre en lo alto del instrumento, por encima del espécimen
ALTO VACÍO
No es necesario
Imprescindible, para facilitar el desplazamiento de los electrones
RESOLUCIÓN
0,2 µm
0,2nm
Tabla 5-2.-Comparación entre las características generales de los microscopios de luz y microscopios electrónicos.
 
 

Figura 5-12.-Comparación de tres tipos de microscopios y suscaracterísticas más resaltantes. Tomado de Gartner, L., Hiatt, J. (2002). Texto Atlas de Histología (95).
 
 

 
AUTOEVALUACIÓN PARA EL CAPÍTULO 5: EL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO
1. ¿Cuáles hallazgos científicos de la década de 1920-1930 fueron trascendentales para el desarrollo de la microscopía electrónica?
2. ¿Qué es un microscopio electrónico y cuál es su fundamento?
3. ¿Cuáles son las propiedadesfísicas del electrón que le permiten ser empleado para la obtención de imágenes microscópicas?
4. ¿En qué consiste la técnica de microscopía electrónica de transmisión?
5. ¿En qué consiste la técnica de microscopía electrónica de barrido?
6. Enumere los elementos que conforman al microscopio electrónico de transmisióny cite las propiedades de cada uno de ellos.
7. ¿Mediante cuáles mecanismos sepueden obtener electrones libres para ser utilizados en el microscopio electrónico?
8. Describa la naturaleza y tipos de lentes que se emplean en la microscopía electrónica.
9. Establezca las semejanzas y diferencias fundamentales entre las lentes electromagnéticas del microscopio electrónico y las lentes de cristal del microscopio fotónico.
10. Explique el mecanismo de formación de las...