bIOLOGIA
Material
Microscopio
Portaobjetos y cubreobjetos
Agujas enmangadas
Pinzas
Cuchilla
Ápices radicales decebolla
Papel de filtro
Orceína acética
Método
Se introduce con unas pinzas un fragmento de unos 3 ó 4 cm del ápice de raíz de cebolla en un tubo "Eppendorf" con ácido clorhídrico 1 N durantetres o cuatro minutos. Se saca y se coloca sobre un porta limpio. Se corta con una cuchilla un trozo de unos 2 ó 3 mm. Este trozo se trata de colocar hacia la mitad del porta. Con otro sepresiona el ápice de la raíz fuertemente. De esta forma las células se aplastan y los cromosomas aparecerán separados. Se separan los dos portas con cuidado, nos quedará parte de la raíz en uno yparte en otro; con los los portas se puede hacer lo que se indica a continuación. Se deja secar al aire, se le añade una gota de orceína acética y se deja actuar durante unos cinco minutos. Conun trozo de papel de filtro presionando suavemente se absorbe la orceína. Se coloca un cubre encima y con el pulgar se presiona ligeramente la muestra.
Observación
Con el objetivo de mayoraumento escoger una región poco coloreada en la que los cromosomas destacan en rosa-malva sobre un fondo incoloro. Se distinguen fácilmente núcleos en interfase, así como en diversas fases demitosis. En el núcleo en reposo la cromatina aparece repartida en una fina red roja, mientras que los nucleolos son incoloros. Los núcleos al principio de la profase, parecen contener una red másgrosera que los núcleos en interfase y solamente al final de la profase tiene lugar la aparición clara de los cromosomas.
La metafase y anafase se ven con claridad. La escisión de loscromosomas se puede observar a menudo en la metafase, pero los centrómeros no se distinguen nunca. Los núcleos de telofase se distinguen de los de la profase porque están dispuestos por parejas.
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