Biologia

Asignatura: Biología General

Practica de laboratorio No. 1

Reconocimiento de biomoléculas orgánicas: glúcidos, lípidos y proteínas
Preparado por: Estrella Cárdenas C. Profesora de Biología General

OBJETIVOS DE LA PRACTICA   Reconocer la presencia de carbohidratos, lípidos y proteínas en diferentes alimentos de origen animal y vegetal mediante pruebas cualitativas. Interpretar losresultados obtenidos en cada una de las pruebas FUNDAMENTO TEÓRICO Los azucares monosacáridos y la mayoría de los disacáridos poseen poder reductor, que deben al grupo carbonilo que tienen en su molécula (Bohisnski, 1991). Este carácter reductor puede ponerse de manifiesto por medio de una reacción redox llevada a cabo entre ellos y el sulfato de cobre de la solución Feling A que contiene CuSO4 y lasolución Feling B contiene NaOH para alcalinizar el medio y permitir la reacción; al reaccionar estas soluciones con un glúcido reductor se forma óxido de cobre de color rojo ladrillo. El almidón es un polisacárido vegetal formado por dos componentes: la amilosa y la amilopectina. La primera se colorea de azul en presencia de yodo debido a la adsorción o fijación de yodo en la superficie de lamolécula de amilosa, lo cual sólo ocurre en frío. Para esta prueba se utiliza una solución denominada Lugol; la cual contiene yodo y yoduro potásico (Campbell y Farrell, 2004). Los lípidos más abundantes son los que posen ácidos grasos, es decir, los lípidos saponificables; los triglicéridos (grasas y aceites) son los más característicos. En estos a una molécula de glicerina se unen tres moléculas deácidos grasos. La reacción de formación será la siguiente: GLICERINA (alcohol) + 3 ACIDOS GRASOS ------------- ÉSTER (triglicérido) + AGUA Los lípidos saponificables reaccionan con NaOH produciendo hidrólisis alcalina; la cual 1

se denominada saponificación; en este proceso se obtiene jabón y se libera glicerina. El jabón es, por consiguiente una sal de un ácido graso: TRIGLICÉRIDO + 3 (NaOH)-------------- GLICERINA + 3(R—COONa) (jabón) La característica común a todos los lípidos es la insolubilidad en agua y solo son solubles en disolventes orgánicos como la gasolina, benceno, acetona, xilol y el cloroformo (Lehninger et al., 2001). Para el reconocimiento colorimétrico de los lípidos se emplea el colorante Sudán III; la prueba positiva de su presencia es que toman un color anaranjado.Las proteínas son macromoléculas formadas por la unión de muchos aminoácidos por enlace peptídico (estructura primaria). También, se dan uniones entre láminas plegadas y alfa-hélice, las cuales hacen que la proteína adquiera una conformación tridimensional (estructura terciaria). Los enlaces peptídicos pueden ser destruidos por variaciones del pH y la temperatura o por concentraciones salinas; deesta forma la proteína pierde su conformación y se desnaturaliza. Las soluciones que forman con el agua pueden precipitar con formación de coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70°C o al ser tratadas con soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc. La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados, que al actuarsobre la proteína la desordenan por la destrucción de su estructura terciaria y cuaternaria (Bohisnski, 1991). La presencia de proteínas se detecta colorimétricamente utilizando el reactivo de Biuret. Esta reacción se produce en péptidos y proteínas. Cuando se ponen en contacto con un álcali concentrado, se forma una sustancia compleja denominada Reactivo de Biuret. El reactivo de Biuret seprepara con sulfato cúprico (CuSO4), hidróxido potásico (KOH) o hidróxido de sodio (NaOH) y tartrato de sodio y potasio (KNaC4O6·4H2O). Una muestra biológica al agregarle reactivo de Biuret, toma un color violeta en presencia de proteínas, y toma coloración rosada cuando la muestra contiene polipéptidos de cadena corta (Switzer & Garrity, 1999).

MATERIALES Y METODOS Materiales y reactivos...