biologo

Guía Práctica 6
Phaeoisariopsis griseola
Enfermedad: Mancha angular
Contenido

Manejo del hongo
en el laboratorio

Guillermo Castellanos, Experto en Investigación–2
Carlos Jara, Ing. Agr. M.Sc., Asociado en Investigación
Gloria Mosquera, Fitopatóloga, Ph.D., Líder de Proyecto
Fitopatología de Frijol

Generalidades
Procedimientos
A. Recolección y transporte de las muestras
B.Preparación del medio de cultivo V8
C. Aislamientos del hongo P. griseola
1. Monospórico con trozos de PDA o de
agar-agua
D. Incremento de P. griseola
E. Inoculación de las plantas
1. Inóculo para el invernadero
2. Inóculo para el campo
F. Conservación de P. griseola para almacenamiento
1. Liofilización
2. Conservación en papel filtro a –20 °C
3. Conservación como suspensión en solución
depeptona-sucrosa, en papel filtro a –20 °C
G. Prueba de almacenamiento
H. Recuperación del hongo almacenado
1. Conservado en suspensión liofilizada en
ampolletas
2. Conservado en papel filtro a –20 °C
3. Conservado a –20 °C en papel filtro de
suspensión en peptona-sucrosa

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GuíasPrácticas de Laboratorio para el
Manejo de Patógenos del Frijol

Generalidades
La mancha angular del frijol, causada por el hongo
Phaeoisariopsis griseola, es una de las enfermedades más
frecuentes de los cultivos de frijol común (Phaseolus
vulgaris) en regiones tropicales y subtropicales. Cuando la
variedad de frijol es muy susceptible al patógeno, los
síntomas iniciales de la enfermedadaparecen, generalmente,
en las hojas primarias como manchas circulares. En los
folíolos de las hojas más desarrolladas, los lados de las
lesiones, definidos generalmente por las nervaduras, forman
ángulos y de ahí se deriva el nombre de la enfermedad
(Foto 1).

Foto 1

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Guía Práctica 6: Phaeoisariopsis griseola
Enfermedad: Mancha angular

Procedimientos
A. Recolección ytransporte de las
muestras
Para aislar el hongo Phaeoisariopsis griseola, se
colecta, de preferencia, el tejido foliar enfermo,
aunque se puede tomar también tejido del tallo o de
las vainas; estos tejidos deben presentar lesiones de
la enfermedad bien desarrolladas. Nunca se deben
recolectar tejidos de plantas viejas o senescente porque
en éstos se encuentran algunos agentes saprofitos
quedificultan el aislamiento de P. griseola. Se debe
descartar también el tejido vegetal enfermo que tenga
señales de daño de insectos o síntomas de otras
enfermedades.
Nota: El aislamiento de este patógeno se facilita
cuando se recolecta tejido foliar infectado, porque en
las hojas aparecen muchas lesiones y de cada lesión
pueden obtenerse uno o varios aislamientos. Cuando
se recolecten vainascon síntomas, deben preferirse las
que estén verdes.

Materiales
–
–
–
–

Toallas de papel
Bolsas de papel
Rótulos para identificar las muestras
Marcador de punta fina o lápiz
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Guías Prácticas de Laboratorio para el
Manejo de Patógenos del Frijol

•

Toallas de papel. La muestra de tejido de frijol
infectado (de hojas, vainas o tallos), una vez
separada de la planta, seenvuelve en una toalla de
papel que sirve, además, para absorber su humedad.
Si no hay toallas, pueden usarse materiales similares
como servilletas, papel higiénico, pañuelos faciales y,
en último caso, papel periódico.

•

Bolsas de papel. Las muestras de tejido infectado
envueltas en algún papel absorbente se colocan en
bolsas o sobres de papel. No se deben usar bolsas
plásticas porqueno son porosas y contribuyen,
por ello, a la acumulación de humedad en su
interior; esta humedad favorece el crecimiento de
microorganismos saprofitos, los cuales dificultarán
el aislamiento del patógeno en los tejidos de frijol
colectados.

•

Rótulos para marcar las muestras. Es muy
importante identificar claramente la muestra con la
siguiente información: variedad (o genotipo) de...