biomoluculas

 
OBJETIVOS:
•
Conocer la cromatografía en columna como técnica de separación de mezclas de sustancias, sus características y los factores que en ella intervienen.
•
Utilizar la cromatografíaen columna para la purificación de una sustancia contaminada con un colorante.
•
Controlar con cromatografía en capa fina el proceso de separación de mezclas por cromatografía en columna.INTRODUCCIÓN:
Las técnicas cromatográficas se emplean para separar los componentes individuales de una mezcla y, en ciertos casos, para identificar un compuesto comparando su comportamientocromatográfico con el desustancias conocidas empleadas como patrón. La base de la técnica es que cuando un determinado soluto interactúa con dos fases, una de ellas, habitualmente sólida, llamada faseestacionaria, experimenta una serie de procesos (adsorción en fasesólida, solubilización en cada fase, arrastre por la fase móvil, etc.) que, en último extremo, llevan a que el soluto se reparta entre ambas fases.En el equilibrio, la relación entre las concentraciones del soluto entre ambas fases es constante, y se denomina
coeficiente de reparto
. Si en una mezcla, cada componente tiene un coeficiente dereparto diferente del de los otros, la separación será buena. Naturalmente, dicho coeficiente depende de la naturaleza de las fases, así como de las condiciones de la cromatografía. Una de las técnicascromatográficas más sencillas es la que se realiza en capa fina, llamada así porque la fase estacionaria es una capa fina de un material poroso (gel de sílice, alúmina, etc.) extendida para su manejomecánico sobre un soporte inerte. La fase móvil es una mezcla de disolventes en diferentes proporciones, que emigra por la fase estacionaria debido, sobre todo, a la capilaridad. En su movimiento,arrastra más o menos a los componentes de una mezcla en función de sus mayores o menores coeficientes de reparto. El coeficiente de reparto es poco empleado en la práctica. En su lugar, y relacionado...