bioprocesos

Mayo de 2012. Material elaborado por el Dr. Fabio Alape Benítez para el curso microbiología de
procesos industriales adaptaciones del texto del curso PRINCIPIOS DE INGENIERIA DE LOS BIOPROCESOS,
dePauline Doran.
ANALISIS DE PROBLEMAS
11.4 La lactasa, (β-galactasidasa), cataliza la hidrólisis de la lactosa para producir glucosa y galactosa a
partir de la leche y el suero. Se realizaronexperimentos para determinar los parámetros cinéticos para
la enzima. Calcular Vmax y KM usando dos diferentes tipos de análisis.
Concentracion Velocidad inicial
Lactosa
de reaccion
mol/l x 102mol/l•min x 102
S
V
2.5
1.94
2.27
1.91
1.84
1.85
1.35
1.8
1.25
1.78
0.73
1.46
0.46
1.17
0.204
0.771
Metodología:
Asumiendo el modelo de Michaelis-Menten, [

(

) ], podemos analizarlos datos

presentados de acuerdo con varios autores de los cuales seleccionamos el análisis tipo Lineweaver-Burk
y el de Langmuir.
Lineweaver-Burk:
Transformando matemáticamente el modelo deMichaelis-Menten podemos obtener:

Graficando 1/V vs. 1/S tenemos que usando técnicas de regresión lineal, podemos encontrar una línea
recta que represente los datos con su intercepto,

y supendiente,

así como un valor de R2,

(una buena representación de los datos en forma lineal debería tener un valor de R2 > 0.8).

Entonces los parámetros cinéticos se calculan así:

Mayo de 2012.Material elaborado por el Dr. Fabio Alape Benítez para el curso microbiología de
procesos industriales adaptaciones del texto del curso PRINCIPIOS DE INGENIERIA DE LOS BIOPROCESOS,
de Pauline Doran.Resultados:
Tabulando 1/S vs. 1/V, teniendo cuidado de transformar la presentación de los datos a sus números
originales, dividiendo por 100 los datos tabulados de la experimentación, y graficando:[l/mol]
1/S
40
44.05286
54.34783
74.07407
80
136.9863
217.3913
490.1961

[l•min/mol]
1/V
51.54639
52.35602
54.05405
55.55556
56.17978
68.49315
85.47009
129.7017

Grafica 1/V...