BIOPRODUCCIÓN DE ÁCIDO LÁCTICO POR LACTOBACILLUS Y SU CRISTALIZACIÓN.

BIOPRODUCCIÓN DE ÁCIDO LÁCTICO POR
LACTOBACILLUS Y SU CRISTALIZACIÓN.
JOHANNA JASSEL HIGUERA PARRA

Introducción: El ácido láctico es utilizado en la industria alimentaria, farmacéutica, cosmética y como materia prima para la síntesis orgánica o la producción de plásticos biodegradables. Todas las bacterias de acido láctico fermentan diversos azucares, produciendo acido láctico encantidades suficientemente elevadas como para inhibir o matar a la mayoría de los microorganismos. Pero, con unas pocas excepciones, que incluyen algunos estreptococos, las bacterias del acido láctico son inocuas para la especie humana y, además, sus productos metabólicos tienen sabor agradable. Estas propiedades nos permiten utilizar las bacterias acido lácticas para preparar y conservar alimentos(Ingraha, 1998).
Las bacterias lácticas son microorganismos que están presentes en las vendimias y vinos, pudiendo desarrollarse o no según las condiciones del medio. Las bacterias lácticas enológicas pertenecen exclusivamente a cuatro géneros: Lactobacillus, Leuconostoc, Oenococcus y Pediococcus. Este tipo de bacterias producen más del 85 por 100 de acido láctico a partir de la glucosa y por lavía de la glucolisis
(Togores, 2002).
El objetivo de esta investigación fue producir ácido láctico por biotransformación con Lactobacillus a partir de un medio de cultivo de
Composición química conocida, así como su cristalización.

Metodología:
A) ACTIVACIÓN DEL INOCULO: primero se debe hacer el inoculo se utilizará un probiótico comercial (Yakult), este será activado en cultivoestático por 24 horas (fig.1).

Fig.1: caldo MRS con el probiótico
B) BIOTRANSFORMACIÓN DEL SUBSTRATO:
primero el medio de cultivo (500 ml) se inocula con 50 ml de inoculo y se ajusta el pH a 5.8 y se incuba a 37°C por 48 horas.
Monitorear el proceso por medición del pH y acidez total titulable (%ATT) a las 0, 4, 16, 24, 48 h.

C) PRUEBAS PARA MONITOREAR EL PROCESO.
Medición de pH: Sedeterminará el pH utilizando en potenciómetro, previamente calibrado con soluciones buffer de pH 10 y pH 4. La lectura del pH se realizará directamente en la muestra.
Determinación de acidez total titulable (ATT): Primero pesar 1 g de muestra (inoculo) en un vaso de precipitado de 50 ml, luego se adicionas 10 ml de agua destilada y se agita se medir el pH inicial y se hace una titulación de lamuestra con una solución de NaOH 0.1 N hasta obtener un pH final de 8.4.
Calcular el porciento de acidez total titulable (%ATT), cuantificado como ácido láctico producido por medio de la siguiente fórmula:

D) CRISTALIZACIÓN DEL ÁCIDO LÁCTICO:
El producto de la fermentación se filtra con vacío en embudo bϋchner en papel Whatman No. 41 para eliminar la biomasa (fig.3). Des pues para eliminarimpurezas se le agrega a la solución una pequeña cantidad de carbón absorbente activado y hervirlo por 10 min (fig.4). Se procede a filtrar a vacio la solución en un embudo de bϋchner evitando la cristalización. Posteriormente se realiza el enfriamiento de la solución caliente para la cristalización del ácido láctico, sumergiendo el matraz en una tina con hielo. Se vuelve a filtrar para laobtención de los cristales. Secar los cristales a temperatura y se observa.


Figura 3. Primer filtrado

Figura 4. Adicion del carbón activado




RESULTADOS:
El pH de las muestra fue disminuyendo cada muestreo debido a la formación de acido láctico (grafica 1) mientras que en la titulación los ml gastados fueron aumentado (grafica 2) , en cuanto a la absorbancia, esta fue aumentando(grafica 3), como se muestra a continuación.

PH
HORAS
PH
0
5.81
4
5.75
16
5.49
24
5.32
48
4.25

(Grafica 1)




% ATT
hora
%ATT
0
4.5
4
4.68
16
4.86
24
5.3
48
5.67

(Grafica 2)


ABSORBANCIA
horas
absorbancias
0
0.576
4
0.78
12
1.229
24
1.548
(Grafica 3)

CRISTALIZACION DEL ACIDO LACTICO
Despues de la 48 hrs se procedio a el proceso de obtencion...