Bioquimica espectrofotometria
C I E N T I F I C A
D E L S U R
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA
CURSO : Bioquímica I
PRÁCTICA : 1
TITULO : Espectrofotométria
PROFESOR :INTEGRANTES :
FECHA DE
REALIZACION
DE LA PRÁCTICA: 17/08/12
FECHA DE ENTREGA
DEL INFORME : 31/08/12
2012 – II
Lima – Perú
MARCO TEORICO
La espectrofotometría esun tipo de experimento en el cual se usa la longitud de onda, la cual se mide en nanómetros, se encuentra en el rango de luz visible para medir la absorbancia.
Estas son fracciones de la luz blancacuando se difracta; cuando esta sale del prisma e incide en la muestra se le llama luz incidente.
OBJETIVOS
* Elaborar una curva de absorción de una solución de azul de metileno.
* Calcular enque Long de onda se halla la mejor absorbancia.
PROCEDIMIENTO
Experimento 1.-
Para elaborar una curva de absorción se preparara el siguiente sistema:
Solución de azul de metileno (10 mg/dL) 1mL.
Agua destilada 4 mL.
Luego se procederá a realizar lecturas en el espectrofotómetro a las siguientes longitudes de onda: 560, 580, 600, 620 640, 660, 680 y 700 nm.
Graficar utilizando papelmilimetrado las absorbancias en función de las longitudes de onda y determinar el pico de máxima absorción del azul de metileno, el cual corresponde al mayor valor de la absorbancia.
Resultados
µ| Abs |
340 | 0.215 |
360 | 0.490 |
380 | 0.515 |
400 | 0.226 |
420 | 0.074 |
440 | 0.034 |
460 | 0.017 |
Experimento 2.- Preparación de una curva de calibración con azul demetileno
Preparar un experimento de la siguiente manera:
Tubo # Reactivos | N°1 | N°2 | N°3 | N°4 | N°5 |
mL Azul de metileno (10mg/dL) | 0.5 | 1 | 2 | 3 | 4 |
mL Agua destilada | 4.5 | 4 | 3 | 2| 1 |
Luego leímos los tubos a una longitud de onda de 660nm.
Graficamos en un papel milimetrado los resultados, disponiendo las concentraciones en el eje de abscisas y las absorbancias en el...
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