BIOQUIMICA GEL
Páginas: 9 (2126 palabras)
Publicado: 21 de octubre de 2013
Universidad Nacional Autónoma de México
Facultad de Estudios Superiores Cuautitlan.
Medicina Veterinaria y Zootecnia
Practica #3 Separación e identificación de aminoácidos por cromatografía en papel
Equipo 4
Enríquez Moreno Laura Areli
Guzmán Calderón Saúl
Hernández Resendiz Lessly
Montaño FonsecaAlejandra
Orozco Vaquero Marbella
Zúñiga de Haro Jessica Cristina
Profesores: Juan Carlos Rodríguez Huerta.
Ranulfo Reyes Gama
1151 29-sep-2013
Índice
Resumen............................................................................................1
Introducción.....................................................................................Objetivos.........................................................................................
Marco teórico.................................................................................
Material y Métodos.....................................................................
Resultados.......................................................................................Discusión..........................................................................................
Concusión........................................................................................
Bibliografía......................................................................................
Resumen
Esta práctica de separación de proteínas se realizó con el fin de conocereste método de electroforesis en gel. El experimento trato de hacer un gel de distinta porosidad y pH con 2 partes el gel compactador y el otro separador.
La electroforesis en geles de acrilamida se puede realizar empleando sistemas de uno o más tampones, en estos casos se habla de sistemas tampón continuos o discontinuos.
En los sistemas discontinuos el primer tampón asegura la migración detodas las proteínas en el frente de migración, provocándose la acumulación de todas las que se han cargado en el pocillo.
La separación realmente comienza a partir del momento en el que el frente de migración alcanza la frontera del segundo tampón.
En el esquema se muestran secuencialmente la situación en (a) al principio de la electroforesis, (b) durante el proceso de apilamiento y (c)durante la separación en el gel resolutivo. El primer gel es de mayor poro (menor porcentaje de acrilamida+bisacrilamida) y tiene un pH más ácido que el segundo gel que es el que realmente separa las proteínas.
Este sistema es especialmente adecuado para analizar muestras diluidas sin perder resolución.
Introducción
La electroforesis es un proceso mediante el cual las proteínas migran deacuerdo a su carga en un campo eléctrico y permite determinar el número de proteínas diferentes en una preparación, así como estimar el peso molecular o punto isoeléctrico.
La electroforesis en gel se lleva a cabo en un gel formado por polímero entrecruzado que actúa como un tamiz disminuyendo la migración de las proteínas en función de su carga y peso molecular.
En la electroforesis, laseparación por tamaño e inversa a la que ocurre la cromatografía ya q la maya es continua por lo que la velocidad con la que migran las proteínas en el gel disminuye al aumentar el tamaño.
El gel se coloca en contacto con 2 compartimentos que contienen amortiguador a un pH más alto que el punto isoeléctrico de las proteínas a analizar.
En la electroforesis desnaturalizante, la solución con laproteína se hierve en presencia de un colorante de agentes reductores y detergente.
Este tratamiento rompe los puentes de sulfuro y desnaturaliza completamente a la proteína. En promedio se fija a la molécula SDS por cada 2 aminoácidos ya que ese detergente tiene carga negativa, todas las proteínas adquieren esta carga y se separan en función de su peso molecular.
La polimerización de la...
Universidad Nacional Autónoma de México
Facultad de Estudios Superiores Cuautitlan.
Medicina Veterinaria y Zootecnia
Practica #3 Separación e identificación de aminoácidos por cromatografía en papel
Equipo 4
Enríquez Moreno Laura Areli
Guzmán Calderón Saúl
Hernández Resendiz Lessly
Montaño FonsecaAlejandra
Orozco Vaquero Marbella
Zúñiga de Haro Jessica Cristina
Profesores: Juan Carlos Rodríguez Huerta.
Ranulfo Reyes Gama
1151 29-sep-2013
Índice
Resumen............................................................................................1
Introducción.....................................................................................Objetivos.........................................................................................
Marco teórico.................................................................................
Material y Métodos.....................................................................
Resultados.......................................................................................Discusión..........................................................................................
Concusión........................................................................................
Bibliografía......................................................................................
Resumen
Esta práctica de separación de proteínas se realizó con el fin de conocereste método de electroforesis en gel. El experimento trato de hacer un gel de distinta porosidad y pH con 2 partes el gel compactador y el otro separador.
La electroforesis en geles de acrilamida se puede realizar empleando sistemas de uno o más tampones, en estos casos se habla de sistemas tampón continuos o discontinuos.
En los sistemas discontinuos el primer tampón asegura la migración detodas las proteínas en el frente de migración, provocándose la acumulación de todas las que se han cargado en el pocillo.
La separación realmente comienza a partir del momento en el que el frente de migración alcanza la frontera del segundo tampón.
En el esquema se muestran secuencialmente la situación en (a) al principio de la electroforesis, (b) durante el proceso de apilamiento y (c)durante la separación en el gel resolutivo. El primer gel es de mayor poro (menor porcentaje de acrilamida+bisacrilamida) y tiene un pH más ácido que el segundo gel que es el que realmente separa las proteínas.
Este sistema es especialmente adecuado para analizar muestras diluidas sin perder resolución.
Introducción
La electroforesis es un proceso mediante el cual las proteínas migran deacuerdo a su carga en un campo eléctrico y permite determinar el número de proteínas diferentes en una preparación, así como estimar el peso molecular o punto isoeléctrico.
La electroforesis en gel se lleva a cabo en un gel formado por polímero entrecruzado que actúa como un tamiz disminuyendo la migración de las proteínas en función de su carga y peso molecular.
En la electroforesis, laseparación por tamaño e inversa a la que ocurre la cromatografía ya q la maya es continua por lo que la velocidad con la que migran las proteínas en el gel disminuye al aumentar el tamaño.
El gel se coloca en contacto con 2 compartimentos que contienen amortiguador a un pH más alto que el punto isoeléctrico de las proteínas a analizar.
En la electroforesis desnaturalizante, la solución con laproteína se hierve en presencia de un colorante de agentes reductores y detergente.
Este tratamiento rompe los puentes de sulfuro y desnaturaliza completamente a la proteína. En promedio se fija a la molécula SDS por cada 2 aminoácidos ya que ese detergente tiene carga negativa, todas las proteínas adquieren esta carga y se separan en función de su peso molecular.
La polimerización de la...
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