Bioquimica Metabolica
Bioquímica Metabólica
Xalapa, Ver., 29 de Mayo de 2012
PRACTICA No. 1
“DETERMINACION DE GLUCOSA”
Fundamento: determinar la glucosa en sangre y orina por medio de la colorimetría.
Algoritmo:
1. Se obtiene y se leen las indicaciones del procedimiento
2. Se centrifuga la muestra para obtener el suero o plasma
3. Se rotulan cuatro tubos (2 serán de orina y dos deplasma) y se les agrega reactivo de la siguiente manera:
| Estándar | Blanco |
Estándar o muestra | 20µl | ------- |
reactivo | 2000µl | 2000µl |
4. Incubar durante 10min. A 37 °C
5. Medir la absorvancia y transmitancia de la muestra
6. Realizar los cálculos
Concentración de glucosa (mg/dl) =concentración estándar (100mg/dl)
Muestra
Estándar
X
Cálculos:
0.7
0.29
X 100mg = 241.37mg/dl
Resultados:
Sangre: ABS= 0.7, TRAS= 6%
0.7
0.29
X 100mg = 241.37mg/dl
Orina: ABS= 0.7, TRAS=5%
Blanco: ABS= 0.29, TRAS=52%
PRACTICA NO. 2
“DETERMINACION DE GLUCOSA POSPANDRIAL”
Fundamento: ladeterminación de glucosa se efectúa mediante el método de trinder según las siguientes reacciones:
Glucosa + O2 + H2O H2O2 + Glucotano
2H2O + Fenol + 4- Af Química + 4H2O
Algoritmo:
| Blanco | Estándar | Muestra |
Estándar | ------ | 10µl | ------ |
Muestra | ------ | ------ | 10µl |
Reactivo | 1ml | 1ml | 10µl |
POP muestra
=concentración estándar X 100
DOP estándar
Calculo:
Mg/dl glucosa=
0.288
0.116
= 2.48 X 100 =248.27mg/dl (después de la comida)
RESULTADOS:
0.713
0.116
= 6.146 X 100 =614.6mg/dl (después de la comida)
Suero: ABS= 0.288
Orina: ABS=0.713
Estándar: ABS=0.116
Valores normales: 55 a 110 mg/dl
PRACTICA NO. 3
“LIPIDOS TOTALES”
Fundamento:determinar por medio de la colorimetría los lípidos totales en suero y plasma.
Algoritmo:
1. Marcar 3 tubos como blanco, estándar y muestra
2. Obtener muestra del paciente
3. Centrifugar para obtener plasma
4. Realizar la técnica de los tubos que se muestra en la tabla
5. Mezclar bien, cerrar los tubos e incubar 10min. En baño de agua hirviendo
6. Colocar por 5min en baño de agua fría
| Blanco | Estándar | Muestra |
Estándar | ------ | 0.05ml | ------- |
Muestra | ------ | ------ | 0.05ml |
Blanco | ------ | 2.0ml | 2.0ml |
7. De las mezclas anteriores pasar a otra serie de tubos
| B | EA | MA |
Estándar acido | ------- | 0.1ml | ------ |Muestra acida | ------- | ------ | 0.1ml |
Ac. Sulfúrico | 0.1ml | ------ | ------ |
Reactivo de color | 2.0ml | 2.0ml | 2.0ml |
8. Mezclar bien e incubar a 37°C por 15 min o 30min a temperatura ambiente
9. Leer absorvancia a 530nm, ajustando a cero con el blanco.
ABS de la muestra
ABS del estándar
X Concentración del estándar
Lípidos totalesmg/dl =
Cálculos:
0.175
0.175
X 1000= 648.14mg/dl
Resultados:
ABS estándar=0.027
ABS muestra= 0.175
Valores normales: 450 a 1000mg/dl
RESULTADOS DE LAS PRACTICAS |
Determinación de Glucosa | Paciente de 59 años sexo femenino se le realizo la determinación de glucosa en un ayuno de aprox. 8Hrs. Dando como resultado 241mg/dl ensangre y orina con resultados altos ya que el rango es de 50 a 110mg/dl; de acuerdo a análisis anteriores presenta glucosa elevada, se encuentra en tratamiento para mantenerla controlada. |
Glucosa Pospandrial | Después de la determinación de glucosa se le realizo la técnica pospandrial donde se le tomo la muestra después de la comida ligera, un caldo de pollo pan tostado y te y se obtuvo...
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