Bioquimica metodos de analisis



UNIVERSIDAD COLEGIO MAYOR DE CUNDINAMARCA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE BACTERIOLOGÌA Y LABORATORIO CLINICO
BIOQUÌMICA APLICADA
TALLER METODOLOGIAS DE CUANTIFICACION

NOMBRES: Diana Rocio Arango Lopez, Kimberly Rossan Avila Quintero, Brayan Espejo, Natalia Jimena Angel.
FECHA: 21/08/15
GRUPO: IV - C
TECNOLOGIA
FUNDAMENTO
CLASIFICACION DE ACUERDO AL DISEÑO DE LA PRUEBA
MOLECULAUTTILIZADA PARA EL MARCAJE
TECNOLOGIA DE DETECCION
EJEMPLOS (5) DE ANALITOS CUANTIFICADOS POR ESTA TECNOLOGIA
RIA: es un tipo de inmunoensayo o método radioinmunométrico que se basa en la formación específica de los complejos antígeno-anticuerpo (Ag-Ac) .
1. Se mezcla una cantidad constante de antígeno marcado radioactivamente y una cantidad constante de un anticuerpo para ese antígeno.
2. Seproduce la reacción entre (Ag) y (Ac)
3. se separa la fracción de antígeno que se ha unido de la que permanece libre
4. se determina la radioactividad
5.Si la muestra contiene además antígeno frío (no marcado), éste competirá con el marcado para unirse al anticuerpo, y se observará un descenso en la medida de la radioactividad
6.Este descenso es proporcional a la concentración de antígeno frío en lamuestra


Pruebas inmunológicas.
Utiliza isotopo radioativos como marca.

Ejm: Yodo radiactivo I125, I131
ensayo in vitro,

Radioinmunoanálisis (RIA)
RIA en fase soluble
RIA en fase sólida
Detección inmunorradiométrica para antígeno



La prueba RAST es un ejemplo de radioinmunoensayo. Se utiliza para detectar el alergeno causante de una alergia.

Medicion de hormonas.

Concentración de complejosde insulina antiisulina en diabéticos.

Medicion de proteínas seericas

Medicion de farmcos y vitaminas.






IRMA
Técnica analítica inmunológica que utiliza un anticuerpo marcado. Un exceso de
anticuerpo en fase sólida se hace reaccionar con el antígeno a medir, tras la incubación
se elimina el Ag libre y se agrega un anticuerpo radiomarcado en exceso que se unirá a
un segundo determinante delAg. Finalmente se elimina el anticuerpo radiactivo libre y
se cuenta la radiactividad del complejo anticuerpo frío-antígeno-anticuerpo radiactivo.
Ac + Ag ↔ Ac-Ag

Ac-Ag + Ac* ↔ Ac-Ag- Ac*

Estos análisis, llamados también “en sándwich” son más sensibles que los de
competición, pues en teoría se mide todo el antígeno presente en la muestra .

1. Se inmoviliza una concentración fija del Ac1 (nomarcado) en un soporte sólido. Tras lo que se satura el soporte.
Se añade la muestra problema (o de calibrado) de Ag.
2. Se añade Ac*2 (marcado) que se una a otro epítopo del Ag.
3. Eliminación del Ac*2 no unido.
4. Se determina la cantidad de anticuerpo marcado unido.
5. A partir de una recta patrón se interpola el valor obtenido para saber la concentración de Ag presente o bien se realiza la rectade calibrado.


Pruebas inmunológicas.
Trazador Radioactivo

Un anticuerpo marcado por un radionúclido comúnmente I125.
contador de radiaciones gamma.

La determinación
analítica de la enolasa neuronal específica (NSE).

Niveles de esta hormona en la sangre.

Valoración de Tiroglobulina en suero.

TIROTROPINA.

Ferritina Monoclonal






QL






















QUIMIOLUMINISCENCIA
Se definecomo la emisión de radiación electromagnética (en la región visible o del infrarrojo cercano) producida por una reacción química.
En una reacción directa, dos reactivos, normalmente un substrato y un oxidante en presencia de algunos cofactores, reaccionan para formar un producto o intermedio de la reacción, algunas veces en presencia de un catalizador. Después parte del producto o intermedio pasa aun estado
electrónicamente excitado, que puede a continuación relajarse hasta el estado fundamental con
emisión de un fotón. El substrato es el precursor QL, que se convierte en la molécula excitada electrónicamente, responsable de la emisión de
luz, o bien actúa para transferir la energía en la QL indirecta. El catalizador, enzima o ion metálico, reduce la energía de activación y proporciona
el...