Bioquimica Principis Inmediats

Pràctiques de Bioquímica: Reconeixement de principis immediats

Objectiu:

L’objectiu d’aquesta pràctica és reconèixer els principis immediats de 4 solucions desconegudes. S’han de realitzar diferents proves per reconèixer els principis immediats de les solucions, segons els resultats que ens doni cada prova haurem de realitzar unes de noves o unes altres, per exemple si el resultat de laprimera prova ens diu que la solució no és un glúcid no haurem de realitzar la prova de Fehling (discriminació dels glúcids reductors dels no reductors), haurem de realitzar la prova del biuret (identificació dels pèptids).
A continuació, un esquema de les diferents proves que es poden realitzar, quan s’han d’ utilitzar i quina funció tenen.A continuació, un esquema de les proves que s’han tingut que utilitzar per a cada solució, quins resultats ens ha donat cada prova i quin és el resultat final (identificar substància).
Material i procediment experimental de totes les proves que s’han tingut que realitzar

1.Prova de Molisch

Material: -Solució problema
-àcid sulfúric concentrat-reactiu de Molisch
-Tub d’assaig

Procediment experimental:

1.Es posen uns 2 ml de solució problema en un tub d’assaig.
2.S’afegeixen unes 5 o 6 gotes de reactiu de Molisch i s’agita la mescla.
3.Amb molt de compte i sense agitar es deixa relliscar per les parets del tub d’assaig uns 2 ml d’àcid sulfúric concentrat. Es formen dues fases separades de diferents densitats. Sien la interfície apareix un anell de color violat, la reacció és positiva, indica la presència de glúcids.

Les 4 solucions han donat resultat positiu en aquesta prova.

Perquè l’anell de color violat ens indica la presència de glúcids?
Els sucres poden deshidratar-se amb àcid sulfúric concentrat, formant compostos derivats del furfural. Les pentoses donen lloc a furfural i les hexoseshidroximetilfurfural. Cada molècula de furfural condensa amb dues d’ -naftol, donant lloc a un producte de color violat.

2.Prova de Fehling

Material:-Solució problema
-Reactiu de Fehling A
-Reactiu de Fehling B
-Tub d’assaig
-Cremador de gas
-Encenedor
-Bol amb aigua
-Pinces de fustaProcediment experimental:

1. Es posen en un tub d’assaig 1,5 ml de solució A i 1,5 ml de solució B de reactiu de Fehling i s’agita.
2. Es posa el tub en un bany d’aigua bullint durant uns 5 minuts. Si es forma un precipitat de color vermell totxo la reacció és positiva.

Les solucions 2,3 i 4 han donat positives, la 1 negativa.

Perquè el precipitat de color vermell totxo ens indica que el glúcidés reductor?

El reactiu de Fehling està format per dues solucions A i B. La A és una dissolució de sulfat de coure i la B és una dissolució d’hidròxid de potassi i tartrat de sodi i potassi. Quan el sulfat de coure entra en contacte amb l’hidròxid de potassi es forma hidròxid de coure (II) que és de color blau i insoluble. L’hidròxid de coure, es pot solubilitzar gràcies a que forma un complexamb l’ió tartrat. Quan s’afegeix al reactiu de Fehling un compost reductor, aquest últim s’oxida reduint el Cu a Cu . Com que el medi és bàsic, es produeix la precipitació de , de color vermell totxo.

3.Prova de Barfoed

Material: -Solució problema
-Reactiu de Barfoed
-Tub d’assaig
-Cremador de gas
-Encenedor-Bol amb aigua
-Pinces de fusta

Procediment experimental:

1. Es posen uns 2 o 3 ml de solució problema en un tub d’assaig i s’afageix la mateixa quantitat de reactiu de Barfoed.
2. S’agita i es posa en un bany d’aigua bullint. La formació ràpida de precipitat vermell (de 2 a 5 minuts) ens indica la presència de monosacàrids. La formació lenta del mateix precipitat (de...